Anticorpo policlonale anti-SP2 per WB, ELISA - Q02086

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di SP2

• SP2 è un fattore di trascrizione a dita di zinco appartenente alla famiglia Sp/KLF, caratterizzato da domini a dita di zinco di tipo C2H2 che facilitano il legame al DNA.
• Si lega selettivamente agli elementi del promotore GC-box (5'-GGGCGG-3') e regola la trascrizione dei geni target.
• SP2 agisce principalmente come attivatore trascrizionale, promuovendo la sintesi di mRNA dai geni con siti di riconoscimento GC-box funzionali.
• La proteina si localizza nel nucleo, coerentemente con il suo ruolo nella regolazione trascrizionale.
• Lo splicing alternativo del gene SP2 genera molteplici isoforme, espandendo potenzialmente il suo repertorio regolatorio.
• SP2 è soggetta a fosforilazione, una modifica post-traduzionale che può modularne l'attività, il legame al DNA o le interazioni proteiche.
• Come proteina legante i metalli, i suoi motivi a dita di zinco coordinano gli ioni zinco essenziali per l'integrità strutturale e il riconoscimento del DNA.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 240-331 di SP2 umano, una regione che può comprendere parte del dominio a dita di zinco o sequenze linker; tenerne conto quando si valuta la specificità dell'isoforma.
• Per il Western blotting, il peso molecolare atteso è di circa 65 kDa; verificare la dimensione della banda in condizioni riducenti e non riducenti e notare che le modifiche post-traduzionali possono causare lievi spostamenti.
• Questo anticorpo policlonale può riconoscere molteplici isoforme o varianti di splicing di SP2 data la sua natura; convalidare la specificità utilizzando il knockdown mediato da siRNA o linee cellulari SP2-negative, se disponibili.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con SP2 di topo, indicando la conservazione dell'epitopo; per studi su topi, confermare il riconoscimento della proteina endogena in tessuti o lisati cellulari rilevanti.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come controllo positivo e considerare le condizioni di rivestimento e i buffer di bloccaggio per ridurre al minimo il background.
• Includere controlli appropriati (es. siero pre-immune, bloccaggio con peptide) per distinguere i segnali specifici dal legame aspecifico tipico delle preparazioni policlonali.

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