Anticorpo Policlonale Anti-SPAG5 per IF/ICC, ELISA - Q96R06

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SPAG5

• SPAG5 (Sperm-associated antigen 5), anche noto come Astrin, Deepest e MAP126, è una proteina di 134 kDa altamente espressa nel testicolo. Si localizza nel citoplasma, nel fuso mitotico, nei poli del fuso, nei cinetocori, nel corpo mediano e nei centrosomi.
• Componente essenziale del fuso mitotico, richiesto per la normale segregazione cromosomica e la progressione in anafase. Riferimenti correlati: PMID:11724960, PMID:12356910, PMID:27462074
• Necessario per l'allineamento cromosomico, la corretta tempistica della segregazione delle cromatidi sorella e il mantenimento dell'architettura del polo del fuso. Riferimenti correlati: PMID:17664331, PMID:27462074
• In complesso con SKAP, promuove attaccamenti stabili microtubulo-cinetocoro e può regolare l'attività della separasi.
• Può regolare la localizzazione di AURKA sul fuso mitotico e di CCNB1 sia sul fuso che sui centrosomi. Riferimenti correlati: PMID:18361916, PMID:21402792
• Coinvolto nella duplicazione dei centrioli; necessario per la localizzazione centrosomiale di CDK5RAP2, CEP152, WDR62 e CEP63, e promuove la localizzazione centrosomiale di CDK2. Riferimenti correlati: PMID:26297806
• Nelle cellule non mitotiche, inibisce mTORC1 reclutando RPTOR nei granuli di stress in condizioni di stress, prevenendo l'apoptosi indotta da iperattivazione di mTORC1. Riferimenti correlati: PMID:23953116
• Può potenziare la fosforilazione mediata da GSK3B di substrati come MAPT/TAU. Riferimenti correlati: PMID:18055457

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 1-300 di SPAG5 umano, che può generare anticorpi mirati a multipli epitopi lungo la regione N-terminale.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), considerare l'uso di cellule mitotiche (es. HeLa o U2OS sincronizzate con nocodazolo) per visualizzare la localizzazione sul fuso e sui cinetocori. Ottimizzare i protocolli di fissazione/permeabilizzazione per preservare la struttura del fuso.
• Per l'ELISA, proteina SPAG5 ricombinante o lisati cellulari da testicolo o cellule mitoticamente attive possono servire come controlli positivi. Eseguire una titolazione dell'anticorpo per determinare la diluizione di lavoro ottimale.
• Validare la specificità dell'anticorpo nel sistema di campioni rilevante (es. knockdown con siRNA o knockout con CRISPR) per confermare il rilevamento specifico di SPAG5.

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