Anticorpo monoclonale di coniglio anti-SPAM1 per WB, IHC-P, ELISA - P38567

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SPAM1

• SPAM1 (molecola 1 di adesione dello spermatozoo), designata anche ialuronidasi PH-20, ialuronoglucosaminidasi PH-20 o proteina di superficie dello spermatozoo PH-20, è una glicoproteina di membrana ancorata al glicosilfosfatidilinositolo (GPI).
• Funziona come ialuronidasi, degradando enzimaticamente l'acido ialuronico nella matrice delle cellule del cumulo che circonda l'ovocita, facilitando così la penetrazione dello spermatozoo durante la fecondazione.
• SPAM1 è fondamentale per l'adesione spermatozoo-ovocita e media il contatto iniziale tra lo spermatozoo e il complesso cumulo-ovocita.
• In quanto membro della famiglia delle ialuronidasi, è classificata come glicosidasi (idrolasi) specializzata nella degradazione dell'acido ialuronico.
• La proteina è localizzata sulla membrana della cellula spermatozoaria ed è espressa in modo specifico nei testicoli.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione legata all'N, la formazione di ponti disolfuro e un'ancora GPI che la fissa alla membrana.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, ampliandone potenzialmente il repertorio funzionale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza interna (aa 61–223) di SPAM1 umano; pertanto, si prevede che l'anticorpo riconosca SPAM1 a lunghezza intera e le isoforme che includono questa regione.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare un lisato di testicolo umano o un estratto proteico di spermatozoi come controllo positivo, data l'espressione specifica del tessuto; il peso molecolare previsto è di circa 58 kDa, sebbene la glicosilazione possa causare uno spostamento.
• Nell'immunoistochimica su sezioni incluse in paraffina (IHC-P), ottimizzare il recupero antigenico e validare la reattività nel tessuto testicolare umano.
• Per le applicazioni ELISA, utilizzare la proteina SPAM1 ricombinante o lisati cellulari che esprimono il bersaglio per il rivestimento o la rilevazione.
• La reattività crociata con il ratto suggerisce la conservazione dell'epitopo; confermare l'idoneità per i campioni di ratto mediante allineamento delle sequenze e validazione sperimentale.

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