Anticorpo policlonale coniglio anti-SPAM1 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P38567

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SPAM1

• SPAM1 codifica per l'ialuronidasi PH-20, indicata anche come molecola di adesione degli spermatozoi 1, ialuronoglucosaminidasi PH-20 e proteina di superficie degli spermatozoi PH-20.
• La proteina è una glicoproteina di membrana cellulare ancorata al glicosilfosfatidilinositolo (GPI) appartenente alla famiglia delle glicoside idrolasi, dotata di attività catalitica ialuronoglucosaminidasica.
• Gioca un ruolo fondamentale nella fecondazione digerendo l'acido ialuronico, il componente principale della matrice extracellulare delle cellule del cumulo che circonda l'oocita, facilitando così la penetrazione dello spermatozoo verso la zona pellucida.
• Localizzata sulla membrana cellulare dello spermatozoo, SPAM1 media gli eventi di adesione cellulare e di riconoscimento durante il legame spermatozoo-uovo.
• L'espressione è prevalentemente limitata al tessuto testicolare.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione N-legata, un ancoraggio GPI e la formazione di legami disolfuro essenziali per la stabilità strutturale; la proteina subisce anche splicing alternativo per generare isoforme varianti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione centrale conservata di SPAM1 umano, potenzialmente in grado di abilitare la reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto come indicato; tuttavia, l'allineamento delle sequenze dovrebbe essere verificato per varianti di specie specifiche.
• Per il western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 58 kDa; l'espressione endogena può essere specifica per i testicoli, pertanto dovrebbero essere utilizzati lisati di tessuti appropriati (es. testicolo umano, murino o ratto) come controlli positivi.
• Nell'immunofluorescenza e nell'immunoistochimica, è richiesta la permeabilizzazione per il rilevamento dell'epitopo intracellulare; le condizioni ottimali di fissaggio e permeabilizzazione potrebbero richiedere un'ottimizzazione empirica per diversi tipi di campioni.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; considerare la titolazione della concentrazione dell'anticorpo per stabilire un intervallo dinamico adatto per il saggio.

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