Anticorpo policlonale di coniglio anti-SPARC per IHC-P, ELISA - P09486

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SPARC

• SPARC (proteina secreta acida e ricca di cisteina), nota anche come osteonectina o BM-40, è una glicoproteina matricellulare che modula le interazioni cellula-matrice e regola la crescita cellulare.
• Si lega agli ioni calcio e rame e interagisce con vari componenti della matrice extracellulare, tra cui collagene, trombospondina e albumina, nonché con fattori di crescita come PDGF e con le membrane cellulari.
• SPARC contiene due domini di legame del calcio: un dominio acido a bassa affinità che lega 5–8 ioni Ca²⁺ e un motivo EF-hand ad alta affinità.
• La proteina viene secreta nello spazio extracellulare ed è un componente della membrana basale, in linea con il suo ruolo nel rimodellamento e nella riparazione dei tessuti.
• Tra le caratteristiche principali figurano molteplici ponti disolfuro, la glicosilazione e l'associazione con l'osteogenesi imperfetta quando è mutata.
• SPARC è stata identificata mediante sequenziamento diretto delle proteine e approcci proteomici, sottolineandone l'abbondanza e la rilevanza clinica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende la proteina SPARC matura (residui 18–303), coprendo entrambi i domini di legame del calcio; per la IHC-P, prendere in considerazione il recupero antigenico e le fasi di blocco per preservare gli epitopi conformazionali.
• Per l'ELISA, immobilizzare l'antigene in condizioni che mantengano l'integrità dei ponti disolfuro e, se necessario, valutare la reattività crociata con altre proteine matricellulari.
• Quando si colorano tessuti umani, murini o di ratto, validare l'anticorpo nella specie pertinente includendo controlli positivi e negativi, poiché gli anticorpi policlonali possono presentare variabilità tra i lotti.
• Come punti di partenza, considerare diluizioni comprese tra 1:50 e 1:500 per la IHC-P e tra 1:1000 e 1:5000 per l'ELISA, ottimizzandole in base al sistema di rilevazione e al tipo di campione.

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