Anticorpo monoclonale coniglio Anti-SPHK1 per WB ed ELISA - Q9NYA1

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SPHK1

• SPHK1 (sfingosina chinasi 1), nota anche come SK1 e acetiltransferasi SPHK1, è un enzima multifunzionale codificato dal gene SPHK1 (Gene ID: 8877) nell'uomo. Appartiene alla famiglia delle sfingosina chinasi e svolge ruoli chiave nel metabolismo e nella segnalazione degli sfingolipidi.
• Catalizza la fosforilazione della sfingosina per formare sfingosina 1-fosfato (S1P), un mediatore lipidico bioattivo con funzioni intracellulari ed extracellulari. Agisce specificamente sulla D-eritro-sfingosina e sulla sfinganina, ma non su altri lipidi. Riferimenti correlati: PMID:11923095, PMID:20577214, PMID:23602659
• In contrasto con la SPHK2 pro-apoptotica, regola negativamente i livelli intracellulari di ceramide, migliora la crescita cellulare e inibisce l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:16118219
• Media la segnalazione del TNF: tramite S1P, stimola l'attività ligasi E3 ubiquitina di TRAF2 e promuove l'attivazione di NF-kappa-B, portando alla secrezione di IL-17. Regola negativamente anche l'induzione di RANTES attraverso la via p38 MAPK in risposta al TNF. Riferimenti correlati: PMID:20577214, PMID:23935096
• Mostra attività serina acetiltransferasica su PTGS2/COX2 in modo dipendente da acetil-CoA, influenzando la secrezione neuronale di mediatori specializzati preresolutivi (SPM) come la 15-R-lipossina A4 durante la neuroinfiammazione.
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo, nella membrana cellulare, nella membrana degli endosomi, nelle fossette rivestite da clatrina e nelle sinapsi, riflettendo i suoi ruoli diversificati nella segnalazione e nel traffico di membrana.
• Ampiamente espresso, con i livelli più alti nel fegato, rene, cuore, muscolo scheletrico e corteccia cerebrale adulti. Riferimenti correlati: PMID:29662056
• Contiene domini di legame per l'ATP e la calmodulina; regolata da fosforilazione e splicing alternativo (parole chiave UniProt: Chinasi, Transferasi, Fosfoproteina, Splicing alternativo).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro la regione N-terminale (aa 1-160) di SPHK1 umana (NP_001136074.1). Questa regione è comune a più isoforme e può fornire un rilevamento ampio; verificare l'allineamento delle sequenze per esigenze isoforma-specifiche.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda vicina a 43 kDa, ma modificazioni post-traduzionali o splicing alternativo possono causare spostamenti della banda. Ottimizzare i controlli di caricamento e la diluizione dell'anticorpo utilizzando lisati positivi e negativi rilevanti.
• Per l'ELISA, considerare l'accoppiamento con anticorpi di cattura/rilevamento validati per SPHK1. Validare la specificità del saggio utilizzando proteina ricombinante e appropriati controlli negativi.
• Utilizzare lisati di tessuto o cellulari con espressione nota di SPHK1 (es. fegato, rene, corteccia cerebrale) come controlli positivi, e includere un controllo negativo (es. knockdown di SPHK1 o tessuto con bassa espressione).

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