Anticorpo Policlonale Anti-SPHK2 per WB e ELISA - Q9NRA0

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della SPHK2

• La SPHK2 (SK2) è una sfingosina chinasi che catalizza la fosforilazione della sfingosina in sfingosina-1-fosfato (S1P). Agisce anche su D-eriitro-diidrosfingosina, D-eriitro-sfingosina e L-treo-diidrosfingosina, e lega i fosfoinositidi. Riferimenti correlati: PMID:12954646, PMID:19168031
• Diversamente dalla SPHK1 che promuove la sopravvivenza cellulare, la SPHK2 regola positivamente i livelli intracellulari di ceramide, inibisce la crescita cellulare e potenzia l'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:16118219
• Nei mitocondri, la S1P generata dalla SPHK2 lega la PHB2 per modulare l'assemblaggio della citocromo c ossidasi e la respirazione mitocondriale tramite il complesso IV. Riferimenti correlati: PMID:20959514
• La SPHK2 nucleare interagisce con HDAC1 e HDAC2; la produzione di S1P inibisce la loro attività deacetilasi, portando ad un aumento dell'acetilazione degli istoni H3-K9, H4-K5 e H2B-K12, regolando così l'espressione genica epigenetica. Riferimenti correlati: PMID:19729656
• Nel nucleo, la SPHK2 può sopprimere la sintesi del DNA e la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:12954646, PMID:16103110
• La SPHK2 si localizza in diversi compartimenti subcellulari tra cui citoplasma, nucleo, reticolo endoplasmatico, membrana mitocondriale interna e membrana lisosomiale.
• È altamente espressa nel rene, fegato e cervello adulti, con arricchimento nella corteccia cerebrale e nell'ippocampo; l'isoforma 1 è predominante nella maggior parte dei tessuti. Riferimenti correlati: PMID:10751414, PMID:29615132, PMID:16103110

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-165, una regione N-terminale; considerare che questo anticorpo può rilevare la SPHK2 full-length (~69kDa) e possibilmente le isoforme contenenti la porzione N-terminale. Convalidare la specificità nel sistema di campionamento pertinente.
• Per il Western blotting, i lisati di rene, fegato o cervello umano sono consigliati come controlli positivi grazie all'alto livello di espressione; si possono testare anche campioni di topo per confermare la reattività crociata.
• Data la molteplicità di localizzazioni subcellulari della SPHK2, considerare di adottare condizioni appropriate di frazionamento subcellulare o di trattamento durante l'analisi della distribuzione proteica.
• Per le applicazioni ELISA, considerare di ottimizzare la coppia di anticorpi e le condizioni di saggio; questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione in un formato ELISA sandwich dopo opportuna convalida.

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