Anticorpo Monoclonale Anti-SPINK5/LEKTI di Coniglio per WB, ELISA - Q9NQ38

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SPINK5/LEKTI (Inibitore della Serina Proteasi di tipo Kazal 5)

• SPINK5 (Serine Peptidase Inhibitor Kazal Type 5) codifica per l'inibitore della serina proteasi LEKTI (Lympho-Epithelial Kazal-Type-related Inhibitor), una proteina secreta multidominio appartenente alla famiglia degli inibitori della serina proteasi di tipo Kazal. Contiene multipli domini Kazal e legami disolfuro, con un peso molecolare di circa 121 kDa.
• LEKTI funge da regolatore chiave dell'attività proteasica nella pelle e negli epiteli mucosi, inibendo le callicreine (KLK5, KLK7, KLK14), la caspasi-14 (CASP14) e la tripsina in modo pH-dipendente. Questa inibizione è cruciale per mantenere la barriera protettiva della pelle e controllare la desquamazione e l'infiammazione.
• La proteina è altamente espressa nel timo e nello strato corneo della pelle, con ulteriore rilevamento nella mucosa orale, ghiandola paratiroide, ghiandole di Bartolini, tonsille ed epitelio vaginale. Si trova a livelli molto bassi in polmone, rene e prostata.
• LEKTI è una proteina secreta che subisce processamento proteolitico, inclusa la scissione in corrispondenza di residui basici appaiati, generando multipli frammenti attivi. Il suo splicing alternativo produce isoforme distinte.
• A causa del suo ruolo nell'inibire le proteasi pro-infiammatorie e pro-desquamative, LEKTI contribuisce alla difesa antimicrobica e previene un'eccessiva degradazione tissutale; mutazioni in SPINK5 sono associate alla sindrome di Netherton, caratterizzata da gravi difetti della barriera cutanea.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 100–200 di SPINK5/LEKTI umano (Q9NQ38), localizzato nella regione N-terminale. Per il Western blot (WB), considerare l'uso di lisati cellulari totali da tessuti con alta espressione di LEKTI (es. pelle, timo) o controlli di proteina ricombinante per validare la specificità dell'anticorpo. Il peso molecolare previsto è di circa 121 kDa, ma potrebbero essere rilevati anche frammenti processati.
• Per applicazioni ELISA, questo anticorpo monoclonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento per quantificare i livelli di LEKTI in fluidi biologici o estratti tissutali. Assicurarsi un'ottimizzazione adeguata delle concentrazioni di rivestimento e delle condizioni di blocco.
• La reattività incrociata con topo e ratto indica la conservazione dell'epitopo, ma è raccomandato l'allineamento della sequenza della regione immunogena tra le specie per confermare il potenziale legame. Validare l'anticorpo nel sistema di campioni rilevante per la propria configurazione sperimentale.
• Data l'attività pH-dipendente di LEKTI, considerare l'effetto del pH sul legame anticorpo-antigene se si sviluppano saggi in condizioni di tampone diverse.

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