Anticorpo policlonale anti-SPRR3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9UBC9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SPRR3

• SPRR3 (Small proline-rich protein 3) è indicata anche come pancornulina da 22 kDa, cornifina beta o esofagina, nomi che riflettono la sua espressione in diversi tessuti epiteliali.
• Funziona come proteina dell'involucro reticolato dei cheratinociti, svolgendo un ruolo strutturale nella formazione dell'involucro cellulare corneo, una barriera critica contro gli agenti ambientali dannosi.
• A livello subcellulare, SPRR3 è localizzata nel citoplasma, dove partecipa all'assemblaggio dell'involucro corneo durante la differenziazione terminale.
• La proteina presenta residui acetilati e contiene sequenze amminoacidiche ripetitive, che contribuiscono alle sue proprietà strutturali.
• Il sequenziamento diretto della proteina ha confermato l'espressione di SPRR3 a livello proteico, supportandone la classificazione come componente del proteoma di riferimento.
• Il peso molecolare previsto di SPRR3 è di circa 18 kilodalton (18.154 Da); tuttavia, il peso molecolare osservato mediante SDS-PAGE è di circa 17 kDa.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai residui 1–70 di SPRR3 umano, una regione ben conservata negli ortologhi di topo e ratto, in linea con la reattività crociata dimostrata. Verificare la reattività specie-specifica se si utilizzano altre specie.
• Per il Western blot, utilizzare lisati ricchi di cheratinociti (ad esempio, pelle ed esofago) o linee cellulari che esprimono SPRR3 come controlli positivi e aspettarsi una banda a circa 17 kDa. Ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo in base al proprio sistema specifico.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, considerare la localizzazione citoplasmatica di SPRR3; la fissazione standard (ad esempio, PFA al 4%) e la permeabilizzazione (ad esempio, Triton X-100 allo 0,1%) sono generalmente adeguate. Includere controlli negativi appropriati.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per il rilevamento diretto o mediante cattura di SPRR3; tuttavia, l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento validato può aumentare la sensibilità del test.
• Essendo un anticorpo policlonale, è necessario verificare la consistenza tra i diversi lotti nei saggi quantitativi; valutare l'utilizzo di standard di riferimento interni per normalizzare i risultati.

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