Anticorpo Policlonale Anti-SPRTN di Coniglio per Western Blot ed ELISA - Q9H040

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di SPRTN (metalloproteasi DNA-dipendente)

• SPRTN è una metalloproteasi DNA-dipendente che si associa al macchinario di replicazione e scinde i crosslink covalenti DNA-proteina (DPC) durante la sintesi del DNA, svolgendo un ruolo chiave nel mantenimento dell'integrità genomica. I DPC sono indotti da agenti reattivi come la luce UV e la formaldeide. Riferimenti correlati: PMID:27852435 PMID:27871365 PMID:27871366
• Proteolizza specificamente HMCES cross-linkato dopo il suo unfolding da parte dell'elicasi BRIP1/FANCJ e ha come bersaglio anche TOP1, TOP2A e gli istoni H3 e H4. Riferimenti correlati: PMID:36608669 PMID:27871366
• L'attivazione di SPRTN richiede la collisione della polimerasi con i DPC seguita dal bypass dell'elicasi; degrada specificamente i DPC non ubiquitinati.
• SPRTN media la scissione di CHEK1 per promuoverne l'attivazione durante la replicazione normale, ma non in risposta al danno al DNA. Riferimenti correlati: PMID:31316063
• La proteina interagisce con PCNA ubiquitinato e RAD18 nei siti di danno UV, facilitando la monoubiquitinazione di PCNA e la sintesi del DNA translesione. Riferimenti correlati: PMID:22681887 PMID:22894931 PMID:22902628
• Localizzata nel nucleo e sui cromosomi, SPRTN subisce acetilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, e contiene un dominio zinc-finger.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per il Western blot, è attesa una banda a circa 55 kDa; validare con estratti nucleari o lisati cellulari totali da linee cellulari umane.
• Quando si esegue l'ELISA, considerare di testare sia il formato diretto che quello sandwich con controlli appropriati per confermare la specificità.
• Poiché l'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-240), l'anticorpo potrebbe rilevare sia SPRTN a lunghezza intera che potenziali frammenti N-terminali; valutare in contesti biologici rilevanti.
• La reattività crociata è stata confermata solo per l'uomo; interpretare i risultati di conseguenza quando si applica ad altre specie.

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