Anticorpo policlonale anti-SPSB1 per WB ed ELISA - Q96BD6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SPSB1

• SPSB1 (proteina 1 contenente il dominio SPRY e la box SOCS), nota anche come SSB1 e SSB-1, è un membro della famiglia delle proteine contenenti il dominio SPRY e la box SOCS.
• Funziona come componente di riconoscimento del substrato di un complesso di ligasi E3 ubiquitina-proteina ECS simile a SCF (proteina della box SOCS-Elongin BC-CUL2/5), mediando l'ubiquitinazione e la successiva degradazione proteasomica delle proteine bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:15601820 PMID:21199876
• SPSB1 regola negativamente la produzione di ossido nitrico (NO) e limita la tossicità cellulare nei macrofagi attivati mediando l'ubiquitinazione e la degradazione proteasomica di NOS2. Riferimenti correlati: PMID:21199876
• Agisce da ponte collegando NOS2 ai componenti ELOC e CUL5 del complesso di ligasi E3 ubiquitina ECS.
• Si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel citosol.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (fosfoproteina).
• Parole chiave: struttura 3D, citoplasma, fosfoproteina, identificazione proteomica, proteoma di riferimento, via di coniugazione Ubl.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-60) di SPSB1 umano; verificare che questo epitopo sia conservato nel topo e nel ratto per la reattività crociata prevista.
• Per il Western blot (WB), si consiglia di iniziare con un intervallo di diluizione compreso tra 1:500 e 1:2000 e di ottimizzare in base al rapporto segnale/rumore nel proprio sistema di campioni.
• Per l'ELISA, testare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione in un formato sandwich o diretto appropriato; effettuare una titolazione per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Convalidare la rilevazione in linee cellulari di macrofagi attivati (ad es., RAW 264.7) o in tessuti in cui sia rilevante la regolazione di NOS2 mediata da SPSB1; includere controlli non trattati per valutare la specificità.
• Data la natura policlonale, valutare la coerenza tra lotti e riconvalidare i test critici quando si utilizza un nuovo lotto.

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