Anticorpo policlonale Anti-SQSTM1/p62 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13501

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SQSTM1/p62

• SQSTM1/p62 (Sequestosome-1), noto anche come p62, EBIAP, p60 e proteina legante l'ubiquitina p62, è una proteina impalcatura multifunzionale coinvolta nell'autofagia selettiva, nella segnalazione e nelle risposte allo stress cellulare.
• Funzione principale come recettore dell'autofagia: SQSTM1 funge da ponte tra le proteine poliubiquitinate e gli autofagosomi. Subisce separazione di fase liquido-liquido legando il carico ubiquitinato tramite il suo dominio UBA, formando corpi p62, e poi interagisce con le proteine della famiglia ATG8 sulle membrane autofagosomiche attraverso il suo motivo LIR, portando alla degradazione sia del carico che di SQSTM1 stesso. Riferimenti correlati: PMID:15340068 PMID:15953362 PMID:16286508 PMID:17580304 PMID:20168092 PMID:22017874 PMID:15911346 PMID:22622177 PMID:37802024
• Attiva la via antiossidante NFE2L2/NRF2 interagendo con KEAP1, risultando nel sequestro di KEAP1 in corpi di inclusione e nell'accumulo nucleare di NRF2, innescando l'espressione di geni citoprotettivi. Riferimenti correlati: PMID:20452972 PMID:28380357 PMID:33393215
• Regola l'organizzazione endosomiale: ubiquitinato da RNF26, SQSTM1 attira adattatori specifici associati alle vescicole, trattenendo le vescicole nella regione perinucleare per facilitare un efficiente trasporto endosomiale. Riferimenti correlati: PMID:27368102 PMID:33472082
• Media la pessofagia (autofagia selettiva dei perossisomi) collegando il recettore ubiquitinato PEX5 agli autofagosomi in risposta allo stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:26344566
• Coinvolto nell'immunità innata promuovendo la ricolocalizzazione dello STING1 ubiquitinato con legame 'Lys-63' verso gli autofagosomi. Riferimenti correlati: PMID:29496741
• Partecipa alla regolazione della segnalazione NF-kappa-B a valle di TNF, NGF e interleuchina-1, e agisce come adattatore tra TRAF6 e CYLD. Riferimenti correlati: PMID:10356400 PMID:10747026 PMID:11244088
• Espresso ubiquitariamente nei tessuti e localizzato in diversi compartimenti subcellulari inclusi autofagosomi, endosomi tardivi, lisosomi, nucleo, reticolo endoplasmatico e corpi p62 citoplasmatici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-440 di SQSTM1 umano (NP_003891.1). Questa regione include i domini PB1, dito di zinco di tipo ZZ e associato all'ubiquitina (UBA), e può riconoscere SQSTM1/p62 endogeno a lunghezza intera.
• Per il Western blot (WB), ci si aspetta una banda a circa 48 kDa. SQSTM1 è degradato dall'autofagia; il trattamento con inibitori lisosomiali (es. clorochina o bafilomicina A1) può aumentare i livelli di rilevamento.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e validare con controlli appropriati, poiché SQSTM1 forma distinti punteggiamenti citoplasmatici (corpi p62) che sono arricchiti in condizioni di stress.
• La reattività crociata è riportata per umano, mouse e ratto; tuttavia, è consigliabile verificare le prestazioni nel proprio sistema di campioni specifico se si utilizzano specie non umane.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere impiegato come reagente di cattura o di rilevamento dopo un'attenta ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e rilevamento.

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