Anticorpo policlonale di coniglio anti-SREBF1 per WB, IF/ICC, ELISA - P36956

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SREBF1

• SREBF1 (noto anche come SREBP1, bHLHd1) codifica un fattore di trascrizione che lega gli elementi di risposta agli steroli e che esiste come precursore integrato nella membrana del reticolo endoplasmatico. In presenza di basse concentrazioni di steroli, viene processato per liberare la forma del fattore di trascrizione, che trasloca nel nucleo. Riferimenti correlati: PMID:32322062
• SREBF1 scisso si lega all'elemento di risposta agli steroli 1 (SRE-1; 5'-ATCACCCCAC-3') e ai motivi E-box (5'-ATCACGTGA-3') nei promotori dei geni coinvolti nella biosintesi del colesterolo e nella via del recettore delle LDL, attivandone così la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:12177166, PMID:32322062, PMID:8402897
• Lo splicing alternativo produce isoforme con attività distinte: l'isoforma SREBP-1A (espressa in tessuti selezionati) presenta un'elevata attività trascrizionale e stimola l'espressione sia dei geni lipogenici sia dei geni colesterogenici, mentre l'isoforma predominante SREBP-1C (espressa nel fegato, nel tessuto adiposo e in altri tessuti) regola principalmente i geni lipogenici e presenta un'attività più debole. Riferimenti correlati: PMID:12177166, PMID:32497488
• Inoltre, un'isoforma che non richiede il processamento proteolitico nel Golgi è costitutivamente attiva nella transattivazione dei promotori dei geni lipogenici.
• A livello subcellulare, SREBF1 cicla tra il reticolo endoplasmatico e le membrane del Golgi; all'attivazione, il frammento del fattore di trascrizione viene rilasciato e trasloca nel nucleo. È inoltre presente nelle vescicole rivestite di COPII.
• SREBF1 è una fosfoproteina ed è soggetto a ubiquitinazione, in accordo con il comportamento dei fattori di trascrizione associati alle membrane e regolati.
• La proteina è ampiamente espressa, con i livelli più elevati nel fegato e nella ghiandola surrenale; nei tessuti fetali, i livelli di espressione massimi si osservano nel polmone e nel fegato. Riferimenti correlati: PMID:8402897
• SREBF1 svolge un ruolo cruciale nel metabolismo lipidico ed è stato associato a varianti patologiche come l'ittiosi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno ricombinante (amminoacidi 200–310 di SREBF1 umano) corrisponde a una regione conservata, suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere più isoforme e potenzialmente reagire anche con topo e ratto, come indicato.
• Negli esperimenti di Western blot, si prevede una banda a circa 122 kDa corrispondente al precursore a lunghezza intera; a seconda dello stato degli steroli cellulari, può essere osservata anche una banda più piccola (circa 68 kDa) che rappresenta il fattore di trascrizione attivo scisso.
• Per l'immunofluorescenza, la localizzazione può includere pattern citoplasmatici/nel reticolo endoplasmatico in condizioni di livelli adeguati di steroli e la traslocazione nucleare in seguito alla deplezione degli steroli; si raccomanda la co-colorazione con marcatori degli organelli.
• Le diluizioni ottimali per WB, IF/ICC ed ELISA devono essere determinate empiricamente utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.

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