Anticorpo policlonale di coniglio Anti-SREBF2 per WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q12772

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SREBF2

• SREBF2 (Sterol Regulatory Element Binding Transcription Factor 2) è un fattore di trascrizione a base helix-loop-helix leucina zipper (bHLH-LZ) fondamentale per l'omeostasi lipidica.
• Agisce come fattore di trascrizione chiave per la biosintesi e l'assorbimento del colesterolo, regolando geni come la HMG-CoA reduttasi e il recettore LDL.
• SREBF2 è sintetizzato come precursore inattivo ancorato alla membrana del reticolo endoplasmatico (RE). Riferimenti correlati: PMID:32322062
• A bassi livelli di colesterolo, il precursore viene trasportato all'apparato di Golgi e processato proteoliticamente per rilasciare il dominio N-terminale attivo, che si trasloca nel nucleo per attivare l'espressione dei geni bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:32322062
• Si lega con alta affinità all'elemento regolatore degli steroli 1 (SRE-1; 5′-ATCACCCCAC-3′) e riconosce anche i motivi E-box (5′-ATCACGTGA-3′), permettendo la regolazione di diversi promotori. Riferimenti correlati: PMID:12177166 PMID:7903453
• SREBF2 è espresso ubiquamente in tutti i tessuti umani adulti e fetali, a conferma del suo ruolo fondamentale nel metabolismo cellulare del colesterolo.
• La proteina si sposta tra RE, Golgi, vescicole COPII e nucleo, con una distribuzione subcellolare strettamente controllata dallo stato di steroli cellulari.
• Modifiche post-traduzionali come la fosforilazione, l'ubiquitinazione e la formazione di legami isopeptidici modulano la sua stabilità e la sua attività.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 401–500 all'interno del dominio N-terminale del fattore di trascrizione; sia il precursore a lunghezza intera (~124 kDa) sia la forma nucleare tagliata (~68 kDa) possono essere rilevati tramite Western blot, a seconda delle condizioni di trattamento cellulare.
• Per i Western blot, si consiglia di utilizzare inibitori di proteasi e di eseguire la deplezione di steroli (ad esempio con statine) per arricchire la forma attiva nucleare.
• Negli esperimenti di immunofluorescenza, la permeabilizzazione e la colorazione di cellule coltivate in condizioni di basso contenuto di steroli può migliorare la localizzazione del segnale nucleare.
• È riportata la reattività crociata con SREBF2 di topo; tuttavia, convalidare l'anticorpo nel vostro tessuto o linea cellulare di topo specifico, poiché i livelli di espressione possono variare.
• L'anticorpo è adatto per applicazioni ELISA; titrare per ottenere un rapporto segnale-rumore ottimale e includere controlli appropriati.

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