Anticorpo policlonale coniglio Anti-SRPK1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q96SB4

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SRPK1

• SRPK1 è una proteina chinasi serina/treonina dipendente da ATP che fosforila specificamente i fattori di splicing SR sui residui di serina all'interno dei domini RS, regolando lo splicing del pre-mRNA.
• Controlla la distribuzione intranucleare dei fattori di splicing nelle cellule in interfase e la riorganizzazione delle speckle nucleari durante la mitosi.
• Al di là dello splicing, SRPK1 influenza la maturazione dell'mRNA, la riorganizzazione della cromatina nelle cellule somatiche e spermatiche e la progressione del ciclo cellulare.
• L'isoforma 2 fosforila substrati tra cui SFRS2, ZRSR2, LBR e PRM1, media la fosforilazione della proteina core dell'HBV e regola negativamente la replicazione dell'HBV riducendo l'efficienza di impacchettamento del pgRNA.
• L'isoforma 1 e l'isoforma 2 promuovono entrambe lo splicing dell'esone 10 in MAPT/TAU e il loro rapporto determina il destino cellulare nelle cellule leucemiche K-562 (l'isoforma 2 supporta la proliferazione, l'isoforma 1 la differenziazione).
• SRPK1 fosforila l'estremità N-terminale di ERC1. Riferimenti correlati: PMID:30745339
• La proteina è localizzata nel citoplasma, nel nucleo, nel nucleoplasma, nelle speckle nucleari, nei cromosomi e nei microsomi.
• Espressione tessuto-specifica: l'isoforma 2 è predominante nel testicolo ed è presente anche a livelli inferiori in molti altri tessuti; l'isoforma 1 è specifica del testicolo e meno abbondante.
• SRPK1 è una fosfoproteina che appartiene alla superfamiglia delle proteine chinasi e contiene una tasca di legame per l'ATP.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 290–480 di SRPK1 umana (NP_003128.3). Si consiglia di verificare la conservazione della sequenza se si utilizza in modelli di topo o ratto.
• Per Western blot, il peso della proteina bersaglio è di circa 74 kDa. Includere controlli di caricamento appropriati e ottimizzare le condizioni di bloccaggio.
• Gli esperimenti di immunofluorescenza/ICC devono tenere conto della localizzazione nucleare e citoplasmatica di SRPK1; la fissazione e la permeabilizzazione standard possono essere adatte.
• I protocolli ELISA possono trarre vantaggio da piastre rivestite con peptide o un formato sandwich; abbinare con un anticorpo di rilevamento corrispondente se necessario.
• Validare le prestazioni dell'anticorpo nel sistema di campioni pertinente, poiché la reattività crociata è stata dimostrata con uomo, topo e ratto.

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