Anticorpo monoclonale anti-SRSF1/SF2/ASF per WB, IHC-P, ELISA - Q07955

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SRSF1

• SRSF1 (fattore di splicing 1 ricco in serina/arginina), noto anche come ASF-1, SF2 o SFRS1, è un membro della famiglia delle proteine SR che svolge ruoli essenziali nello splicing costitutivo e alternativo del pre-mRNA. Due isoforme più corte, ASF-2 e ASF-3, agiscono come repressori dello splicing.
• Previene il salto degli esoni e garantisce l’accuratezza dello splicing formando un ponte tra U1 snRNP e U2AF, favorendo il riconoscimento dei siti di splicing. SRSF1 stimola il legame di U1 snRNP ai siti di splicing 5’ e interagisce con altri componenti dello spliceosoma tramite il suo dominio RS.
• SRSF1 si lega a sequenze di RNA ricche in purine, incluso l’octamero 5’-RGAAGAAC-3’ e i decameri AGGACAGAGC/AGGACGAAGC. In vitro, si lega preferenzialmente al motivo 5’-CGAGGCG-3’. Tre copie dell’octamero costituiscono l’enhancer di splicing ASF/SF2 (ASE), che attiva specificamente lo splicing dipendente da ASE.
• Oltre allo splicing, SRSF1 può agire come adattatore per l’esportazione dell’mRNA, facilitandone l’esportazione nucleare attraverso la via TAP/NXF1.
• A livello subcellulare, SRSF1 è localizzato negli speckles nucleari, nel citoplasma e nei cromosomi, riflettendo i suoi ruoli dinamici nell’elaborazione e nel trasporto dell’RNA.
• La proteina è soggetta a estese modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione, metilazione e ubiquitinazione, che ne regolano l’attività e la localizzazione.
• Varianti genetiche di SRSF1 sono state associate a disabilità intellettiva, evidenziandone l’importanza nello sviluppo neurologico.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, il peso molecolare previsto di SRSF1 è di circa 28 kDa, ma le modificazioni post-traduzionali possono causare spostamenti della banda o la comparsa di bande multiple. Validare il rilevamento in lisati cellulari o tissutali pertinenti.
• Nell’immunoistochimica (IHC-P), si raccomanda di ottimizzare le fasi di recupero antigenico e di blocco. È possibile osservare un pattern di colorazione nucleare puntiforme; validare utilizzando controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l’ELISA, l’anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; si noti che è stato prodotto utilizzando un immunogeno peptidico (aa 100-200), pertanto è probabile che riconosca un epitopo lineare. Eseguire valutazioni della reattività crociata e degli effetti della matrice con tipologie di campione pertinenti.
• La reattività crociata con SRSF1 di topo e ratto consente studi su più specie, ma è sempre necessario confermare la specificità nel sistema sperimentale.
• Essendo un anticorpo monoclonale, ci si aspetta una consistenza tra i diversi lotti, ma ogni nuovo lotto deve essere verificato nell’applicazione prevista.

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