Anticorpo policlonale rabbit Anti-SUB1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - P53999

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di SUB1

• Il gene SUB1 codifica per il coattivatore trascrizionale attivato della RNA polimerasi II p15, noto anche come cofattore positivo 4 (PC4), p14 o omologo SUB1.
• In quanto coattivatore generale, p15/PC4 coopera con i fattori associati alla proteina legante la scatola TATA (TAF) e media le interazioni funzionali tra attivatori a monte e il macchinario trascrizionale generale, stabilizzando potenzialmente il complesso di trascrizione multiproteico.
• La proteina lega il DNA a singolo filamento e, in vitro, lega in modo aspecifico anche il DNA a doppio filamento (dsDNA), suggerendo un ruolo nell'inizio della trascrizione o nel legame con la cromatina.
• SUB1 è localizzata nel nucleo, in linea con la sua funzione nella regolazione trascrizionale.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e coniugazione ubiquitin-simile (legame isopeptidico), che possono modularne l'attività o le interazioni.
• Gli studi strutturali (parola chiave struttura 3D) hanno permesso di ottenere informazioni sulle superfici di legame al DNA e di interazione proteica di SUB1.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi da 1 a 127 della SUB1 umana, corrispondenti all'intera lunghezza della proteina; questo progetto permette di rilevare sia la proteina endogena che quella ricombinante in diverse applicazioni.
• Per western blot, è attesa una banda vicino a 14 kDa in condizioni denaturanti e riducenti; convalidare la specificità utilizzando controlli adeguati e agenti bloccanti.
• L'immunofluorescenza/ICC dovrebbe mostrare una colorazione nucleare; includere la co-colorazione con DAPI e controlli negativi senza anticorpo primario per confermare la localizzazione.
• Per l'immunoprecipitazione, ottimizzare il rapporto anticorpo/lisato e prendere in considerazione la reticolazione se l'interazione con il DNA bersaglio può mascherare gli epitopi.
• Per la rilevazione in ELISA, può essere necessario testare il formato diretto rispetto a quello a sandwich con standard di proteina ricombinante per la quantificazione.

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