Anticorpo monoclonale di coniglio anti-TAP2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q03519

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TAP2

• TAP2 è un trasportatore ABC che, in complesso con TAP1, media la traslocazione unidirezionale degli antigeni peptidici dal citosol al RE per il caricamento sulle molecole MHC di classe I (PubMed:25377891, PubMed:25656091). Riferimenti correlati: PMID:25377891 PMID:25656091
• Durante il ciclo di trasporto, TAP2 alterna conformazioni rivolte verso l'interno (legame con il peptide citosolico) e verso l'esterno (rilascio del peptide nel lume del RE). Il legame e l'idrolisi dell'ATP determinano questi cambiamenti conformazionali (PubMed:11274390, PubMed:25377891, PubMed:25656091). Riferimenti correlati: PMID:11274390 PMID:25377891 PMID:25656091
• TAP2 trasporta preferenzialmente peptidi intracellulari di 8-13 amminoacidi, selezionando residui C-terminali idrofobici o carichi e un residuo idrofobico in posizione 3, mentre la prolina in posizione 2 è destabilizzante (PubMed:11274390, PubMed:7500034, PubMed:9256420). Riferimenti correlati: PMID:11274390 PMID:7500034 PMID:9256420
• Come parte del complesso di caricamento dei peptidi, TAP2 funge da impalcatura molecolare essenziale per l'assemblaggio del peptide-MHC I e per la presentazione stabile degli antigeni (PubMed:1538751, PubMed:25377891, PubMed:26611325). Riferimenti correlati: PMID:1538751 PMID:25377891 PMID:26611325
• La proteina è localizzata nella membrana del reticolo endoplasmatico.
• TAP2 contiene domini di legame dell'ATP, eliche transmembrana e siti di legame per i metalli (magnesio), ed è coinvolta nell'immunità adattativa e nelle interazioni ospite-virus.
• Lo splicing alternativo del gene TAP2 produce molteplici isoforme, contribuendo alla diversità funzionale nel trasporto dei peptidi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blotting, per TAP2 endogeno è prevista una banda a circa 76 kDa. Utilizzare condizioni standard di SDS-PAGE e confermare la specificità con un controllo di caricamento o mediante validazione con knockdown/knockout.
• Nell'immunofluorescenza, la colorazione di TAP2 mostra tipicamente un pattern reticolare perinucleare coerente con la localizzazione nel RE. Validare con una co-colorazione con un marcatore del RE e mediante knockdown mediato da siRNA.
• Per le applicazioni ELISA, questo anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevazione. La combinazione ottimale deve essere determinata empiricamente con un anticorpo complementare diretto contro un epitopo distinto di TAP2.
• L'immunogeno (amminoacidi 450–686) corrisponde al dominio citoplasmatico di legame dei nucleotidi, una regione altamente conservata tra uomo e topo, il che probabilmente spiega la reattività crociata osservata.
• Questo anticorpo non è stato testato in IHC o citometria a flusso; se sono necessarie queste applicazioni, titolare e validare in condizioni appropriate di fissazione/permeabilizzazione.

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