Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-TCIRG1 per WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - Q13488

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della subunità a3 TCIRG1/V-ATPasi

• TCIRG1 (regolatore immunitario delle cellule T 1, noto anche come ATP6V0A3, OC116, a3) codifica per la subunità a3 di 116 kDa del complesso V0 della vacuolare H+-ATPasi (V-ATPasi), un enzima multisubunità responsabile dell'acidificazione dei compartimenti intracellulari e, in alcuni tipi cellulari, dell'ambiente extracellulare.
• La V-ATPasi è costituita da un complesso V1 periferico che idrolizza l'ATP e un complesso V0 integrato nella membrana che trasloca i protoni; la subunità a3 è essenziale per la traslocazione dei protoni attraverso le membrane.
• TCIRG1 è direttamente coinvolto nell'attivazione delle cellule T, come confermato da evidenze che dimostrano il suo ruolo nella regolazione delle cellule immunitarie (PubMed:10329006).
  Riferimenti correlati: PMID:10329006
• Le mutazioni nel gene TCIRG1 sono associate all'osteopetrosi autosomica recessiva, evidenziando la sua funzione critica nel riassorbimento osseo mediato dagli osteoclasti e nella regolazione del pH.
• La proteina presenta diversità di isoforme: l'isoforma lunga è altamente espressa negli osteoclastomi, mentre l'isoforma corta è espressa principalmente nel timo.
• Subcellularmente, TCIRG1 è una proteina transmembrana localizzata sulla membrana delle vescicole intracellulari e sulla membrana plasmatica, dove contribuisce a mantenere l'omeostasi del pH.
• Parole chiave biologiche principali includono splicing alternativo, variante patologica, trasporto di ioni idrogeno, trasporto ionico, membrana, osteopetrosi ed elica transmembrana.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-356 di TCIRG1 umano, un grande dominio citoplasmatico N-terminale. Questa regione è probabilmente ben esposta e può facilitare il riconoscimento sia in condizioni native che denaturate, supportando applicazioni come WB e IHC-P.
• Per il Western blotting è prevista una banda intorno a 93 kDa; si consiglia di utilizzare condizioni denaturanti appropriate, poiché la proteina può aggregare a causa dei domini transmembrana.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC e IF-P), la permeabilizzazione è necessaria per rilevare la proteina legata alla membrana intracellulare. Utilizzare controlli appropriati per verificare la specificità.
• Quando si utilizza IHC-P, i metodi di recupero dell'antigene (ad esempio il recupero dell'epitopo indotto dal calore) possono migliorare la colorazione, specialmente nei tessuti fissati in formalina.
• La reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto consente un potenziale utilizzo nei modelli roditori, ma è necessario convalidare l'espressione e la specificità nel tessuto o nella linea cellulare di interesse.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere adatto per catturare o rilevare l'immunogeno ricombinante; tuttavia, si ricorda che lo stato multimerico della proteina nativa può influenzare il legame in campioni complessi.

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