Anticorpo Monoclonale Anti-TDP-43/TARDBP per WB, IP, IF, IHC, ChIP - Q13148

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TDP-43

• La proteina 43 legante il DNA TAR (TDP-43) è codificata dal gene TARDBP ed è nota anche come ALS10. Appartiene alla famiglia hnRNP e contiene due motivi di riconoscimento dell'RNA (RRM) e un dominio C-terminale ricco di glicina.
• Funziona come proteina legante l'RNA coinvolta in più fasi della biogenesi e dell'elaborazione dell'RNA (PubMed:23519609). Riferimenti correlati: PMID:23519609
• Si lega preferenzialmente alle ripetizioni GU tramite i suoi RRM, localizzandosi agli introni lunghi e alle 3'UTR degli mRNA, regolando così lo splicing di molti RNA, inclusi quelli critici per la sopravvivenza neuronale e la neurodegenerazione (PubMed:23519609, PubMed:24240615, PubMed:24464995, PubMed:21358640, PubMed:29438978). Riferimenti correlati: PMID:23519609, PMID:24240615, PMID:24464995, PMID:21358640, PMID:29438978
• Gioca un ruolo nel mantenere l'omeostasi mitocondriale elaborando i trascritti mitocondriali (PubMed:28794432) e regola la stabilità degli mRNA reclutando deadenilasi alla 3'UTR (PubMed:30520513). Riferimenti correlati: PMID:28794432, PMID:30520513
• In risposta allo stress ossidativo, si associa ai granuli di stress e ai ribosomi bloccati per promuovere la sopravvivenza cellulare (PubMed:19765185, PubMed:23398327). Riferimenti correlati: PMID:19765185, PMID:23398327
• Si localizza nel nucleo, citoplasma, granuli di stress e mitocondri. Espressa ubiquitariamente, con livelli particolarmente elevati nel pancreas, placenta, polmone, tratto genitale e milza.
• Sottoposta a modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione, che regolano la sua funzione e la propensione all'aggregazione. Le mutazioni e la localizzazione errata sono collegate alla sclerosi laterale amiotrofica (ALS) e alla degenerazione lobare frontotemporale (FTLD).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno mira alla regione C-terminale (aa 300–400) del TDP-43 umano, che potrebbe riconoscere sia le forme a lunghezza intera che quelle clivate; considerare questo quando si interpretano i pattern delle bande nel Western blot.
• Per il Western blot, è prevista una banda predominante vicino a 45 kDa; utilizzare controlli positivi appropriati come lisati di tessuto HeLa o cerebrale e convalidare nel proprio sistema di campioni.
• La reattività crociata con mouse e ratto è stata documentata; confermare le prestazioni nelle proprie impostazioni sperimentali, specialmente per l'immunoistochimica dove la fissazione e il recupero dell'antigene possono influenzare la colorazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC), ottimizzare il recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0 o EDTA pH 9.0) e le condizioni di rilevamento per ogni tipo di tessuto.
• Per l'immunoprecipitazione (IP) e l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), verificare l'idoneità dell'anticorpo per il legame alla proteina nativa; notare che TDP-43 è principalmente una proteina legante l'RNA e le interazioni con il DNA potrebbero richiedere l'ottimizzazione del cross-linking.
• Questo anticorpo è stato utilizzato in ELISA; tuttavia, le condizioni del saggio individuale (es. tampone di rivestimento, agente di blocco) dovrebbero essere ottimizzate per ottenere la sensibilità desiderata.

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