Anticorpo monoclonale di coniglio anti-TdT per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04053

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della TdT

• La desossinucleotidiltransferasi terminale (TdT), codificata dal gene DNTT, è una DNA polimerasi indipendente dallo stampo che catalizza l'aggiunta casuale di trifosfati di desossinucleosidi all'estremità 3'-OH degli iniziatori del DNA.
• La TdT svolge un ruolo fondamentale nella ricombinazione V(D)J, aggiungendo nucleotidi non templati (N) alle giunzioni dei segmenti genici delle catene pesanti delle immunoglobuline e dei recettori delle cellule T durante la maturazione dei linfociti B e T.
• L'enzima richiede ioni metallici bivalenti, come il magnesio, per la propria attività catalitica, come indicato dalle parole chiave UniProt «Magnesium» e «Metal-binding».
• La TdT è localizzata prevalentemente nel nucleo, dove si associa al complesso enzimatico della ricombinazione per generare diversità giunzionale.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione, come annotato dalla parola chiave «Phosphoprotein», che può regolare l'attività enzimatica o le interazioni proteiche.
• Lo splicing alternativo del trascritto DNTT produce molteplici isoforme, come indicato dalla parola chiave «Alternative splicing», influenzando potenzialmente la specializzazione funzionale.
• La struttura tridimensionale della proteina è stata risolta (parola chiave «3D-structure»), fornendo informazioni sul meccanismo molecolare dell'aggiunta di nucleotidi indipendente dallo stampo.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 10–124 della TdT umana, una regione probabilmente in grado di generare anticorpi che riconoscono la proteina nativa; si consiglia di verificare la reattività con la TdT endogena in modelli linfocitari pertinenti.
• Per il western blot, è prevista una banda a circa 58–59 kDa; validare il rilevamento in estratti nucleari di timo o di linee cellulari leucemiche note per esprimere la TdT.
• Nell'immunofluorescenza o nell'immunoistochimica, prevedere una colorazione nucleare; includere fasi di permeabilizzazione appropriate e confermare la specificità del segnale utilizzando campioni TdT-negativi o controlli knockout.
• L'anticorpo può essere adatto alla quantificazione mediante ELISA della TdT ricombinante o purificata; ottimizzare l'antigene di rivestimento e il formato di rilevamento in base al sistema di analisi.

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