Anticorpo policlonale anti-TdT di coniglio per WB, ELISA - P04053

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del TdT

• La DNA nucleotidilexotransferasi (TdT), nota anche come enzima di aggiunta terminale o terminal deossinucleotidiltransferasi, è una DNA polimerasi indipendente da stampo codificata dal gene DNTT.
• Catalizza l'aggiunta casuale di deossinucleosidi trifosfati alle estremità 3'-idrossile dei frammenti di DNA, svolgendo un ruolo cruciale nella ricombinazione V(D)J generando diversità nella regione N nei geni delle immunoglobuline e dei recettori delle cellule T durante la maturazione delle cellule B e T.
• Il TdT è un membro della famiglia X delle DNA polimerasi e funziona come nucleotidiltransferasi, richiedendo ioni metallici bivalenti come il magnesio come cofattori.
• La proteina contiene diversi siti di legame metallico essenziali per la sua attività catalitica.
• È localizzato prevalentemente nel nucleo, in linea con il suo ruolo nella modifica del DNA durante lo sviluppo dei linfociti.
• Lo splicing alternato del trascritto DNTT produce multiple isoforme e la proteina subisce fosforilazione, come indicato dagli studi proteomici.
• Gli studi strutturali (parola chiave struttura 3D) hanno fornito approfondimenti sul suo meccanismo ed è classificato come componente del proteoma di riferimento.
• La sua funzione è associata ai tessuti linfoide dove avviene la ricombinazione V(D)J.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 260-509 del TdT umano, una regione che può aiutare a mirare a isoforme specifiche; verificare le prestazioni nel proprio specifico sistema di campioni.
• Per le applicazioni di Western blot (WB), è prevista una banda intorno a 59kDa/58.5kDa (a seconda dell'isoforma); considerare l'uso di controlli di carico appropriati.
• Questo anticorpo policlonale è adatto per ELISA; titolare l'anticorpo per ottimizzare la sensibilità e la specificità per il formato del saggio.
• È indicata la reattività crociata con il TdT di topo e ratto; convalidare in tessuti linfoidi murini o del ratto pertinenti se si utilizzano queste specie.
• Data la localizzazione nucleare del TdT, assicurarsi di eseguire un'estrazione nucleare o una permeabilizzazione adeguata nei protocolli WB.

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