Anticorpo Policlonale Anti-Tec da Coniglio per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P42680

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione della Tirosina-chinasi Tec

• La tirosina-chinasi Tec (codificata dal gene TEC; nota anche come PSCTK4) è una tirosina-chinasi non recettoriale appartenente alla famiglia delle chinasi Tec, caratterizzata da un dominio di omologia alla pleckstrina (PH), un dominio di omologia Tec (TH), i domini di omologia Src 2 e 3 (SH2 e SH3), un dominio chinasi e un motivo a dito di zinco.
• Tec funge da trasduttore di segnale in molteplici vie mediate da recettori, regola il citoscheletro di actina e svolge un ruolo fondamentale nella risposta immunitaria adattativa partecipando alla segnalazione del recettore delle cellule T (TCR) e del recettore delle cellule B (BCR).
• Nelle cellule T, Tec agisce in modo ridondante con ITK per regolare sviluppo, differenziazione e funzione; è necessario per l'induzione del gene IL2 dipendente dal TCR e contribuisce alla segnalazione co-stimolatoria di CD28 attraverso la fosforilazione della proteina adattatrice DOK1.
• Nelle cellule B, Tec supporta in modo ridondante BTK nella segnalazione mediata dal BCR per sviluppo e attivazione, in particolare fosforilando STAP1, una proteina di segnalazione del BCR.
• Al di fuori dei linfociti, Tec è coinvolto nella produzione di citochine da parte dei mastociti, nella crescita e differenziazione delle cellule mieloidi tramite la segnalazione di CSF3 (G-CSF) e nell'attivazione piastrinica a valle delle vie delle integrine e dei recettori accoppiati a proteine G.
• Inoltre, Tec coopera con JAK2 per mediare la trascrizione di FOS indotta dalle citochine, fosforila GRB10, regola la secrezione non convenzionale di FGF2 e può partecipare alla proliferazione degli epatociti e alla differenziazione degli osteoclasti.
• Subcellularmente, Tec si localizza nel citoplasma, sulla membrana cellulare e sul citoscheletro, permettendo l'assemblaggio dinamico di complessi di segnalazione.
• L'espressione di TEC è diffusa nelle linee ematopoietiche, incluse le linee mieloidi, B e T, in linea con le sue ampie funzioni immunoregolatrici.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-280 di Tec umana, che comprende i domini N-terminali PH, TH e SH3. Considera che questa regione può essere conservata tra le specie, a supporto della reattività crociata riportata con topo e ratto.
• Per Western blotting, è prevista una banda a circa 74 kDa in linee cellulari che esprimono Tec come Jurkat (cellula T) o Ramos (cellula B); convalidare la rilevazione nei sistemi di campione pertinenti e includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), Tec dovrebbe mostrare una localizzazione citoplasmatica e membranare; ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per preservare l'accessibilità all'epitopo.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene e la titolazione dell'anticorpo devono essere determinati empiricamente, poiché le prestazioni possono variare in base al tipo di tessuto e alla sua lavorazione.
• Questo anticorpo policlonale può essere utilizzato in ELISA; considerare lo sviluppo di coppie di anticorpi e convalidare sensibilità e specificità utilizzando Tec ricombinante o lisati cellulari.

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