Anticorpo policlonale di coniglio Anti-TEK (TIE2) per WB, ELISA - Q02763

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TEK (Recettore dell'Angiopoietina-1)

• TEK è un recettore di superficie cellulare tirosino-chinasi per le angiopoietine (ANGPT1, ANGPT2, ANGPT4) che regola in modo critico l'angiogenesi, la sopravvivenza, la proliferazione, la migrazione e l'adesione delle cellule endoteliali e la riorganizzazione del citoscheletro.
• Mantiene la quiescenza vascolare prevenendo la fuoriuscita di proteine plasmatiche pro-infiammatorie e leucociti, promuovendo al contempo la stabilità vascolare nell'endotelio a riposo.
• La segnalazione di TEK è dipendente dal contesto: nei vasi quiescenti con stretti contatti cellula-cellula, ANGPT1 recluta TEK alle giunzioni intercellulari e attiva preferenzialmente la via PI3K/AKT1; nelle cellule endoteliali in migrazione prive di adesioni, TEK si localizza alle adesioni focali e stimola l'angiogenesi germinativa attraverso le cascate PTK2/FAK e MAPK1/ERK2/MAPK3/ERK1.
• La modulazione avviene tramite ANGPT2 a minore affinità, che può agire come antagonista competitivo di ANGPT1, tramite eterodimerizzazione con TIE1 e tramite scissione proteolitica che rilascia un recettore esca extracellulare solubile.
• Subcellularmente, TEK si trova sulla membrana cellulare, nelle giunzioni cellula-cellula e nelle adesioni focali; viene inoltre rilevato nel citoplasma, associato al citoscheletro, e secretato come ectodominio solubile.
• L'espressione è prevalentemente nelle cellule endoteliali e nei loro progenitori (angioblasti), con livelli più alti nella placenta e nel polmone; la forma solubile è rilevabile nel plasma sanguigno.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono l'autofosforilazione dipendente dal ligante sui residui di tirosina, la glicosilazione, la formazione di legami disolfuro e l'ubiquitinazione.
• TEK è essenziale per l'angiogenesi embrionale, lo sviluppo cardiaco e l'ematopoiesi postnatale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 500–750 all'interno del dominio citoplasmatico; l'anticorpo è previsto che riconosca la porzione intracellulare di TEK. Per Western blot, in condizioni riducenti dovrebbe essere rilevata una banda vicino a 126 kDa; si consiglia di utilizzare lisati di cellule endoteliali arricchiti di membrana o lisati totali.
• La reattività crociata con uomo, topo e ratto permette studi nei comuni organismi modello. Validare la reattività specie-specifica nel vostro sistema sperimentale prima dell'uso.
• Per le applicazioni ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione specifico per un epitopo non sovrapponibile può migliorare la sensibilità. Ottimizzare le condizioni di rivestimento dell'antigene e di blocco per il formato della vostra piastra.
• Il processamento proteolitico produce un frammento extracellulare solubile di ~75 kDa; questo può comparire in mezzi di coltura condizionati o campioni di plasma. Adeguare la preparazione del campione di conseguenza se si mira alla porzione extracellulare.

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