Anticorpo Monoclonale Anti-TERT per WB, ELISA - O14746

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TERT

• La telomerasi trascrittasi inversa (TERT) è la subunità catalitica del complesso ribonucleoproteico della telomerasi, essenziale per l'aggiunta de novo di ripetizioni telomeriche alle estremità dei cromosomi.
• L'enzima cicla attraverso legame del primer, aggiunta di nucleotidi, traslocazione e rilascio, aggiungendo la ripetizione esamerica 5’-TTAGGG-3’; è attivo principalmente nelle cellule staminali, nelle cellule germinali e nella maggior parte dei tumori, mentre è silenziato nella maggior parte dei tessuti somatici normali.
• Oltre all'allungamento dei telomeri, TERT modula la segnalazione Wnt e influenza l'invecchiamento cellulare e le vie anti-apoptotiche.
• Diversi isoformi derivano da splicing alternativo; la proteina a lunghezza intera è prevalentemente nucleare, localizzandosi nei nucleoli, nel nucleoplasma e nei telomeri, ma è rilevata anche nei corpi PML citoplasmatici.
• L'espressione di TERT è tessuto-specifica: massima nelle sottopopolazioni di timociti, intermedia nei linfociti T tonsillari e bassa o non rilevabile nei linfociti T del sangue periferico.
• La proteina è soggetta a fosforilazione e funziona come una nucleotidiltransferasi legante il DNA e dipendente da metalli, richiedendo magnesio per la catalisi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 1000–1132) di TERT umano, che è ben conservata tra uomo, topo e ratto, supportando la reattività crociata osservata.
• Per il Western blot, aspettarsi una banda vicino a 127 kDa; bande inferiori aggiuntive potrebbero indicare varianti di splicing o degradazione. Includere controlli positivi appropriati (es. lisato di cellule HeLa, lisato di testicolo di topo) e validare nelle proprie condizioni sperimentali.
• In ELISA, considerare l'uso di proteina TERT ricombinante o dell'immunogeno come antigene di rivestimento; sia il formato indiretto che quello sandwich possono essere adatti.
• Poiché l'espressione di TERT è spesso bassa, l'arricchimento (es. estratti nucleari) o l'amplificazione del segnale possono migliorare la sensibilità di rilevamento.
• Sebbene sia indicata reattività crociata con topo e ratto, confermare sempre le prestazioni nel proprio sistema di campioni specifico testando controlli positivi e negativi appropriati.

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