Anticorpo Policlonale Rabbit Anti-TERT per WB, IHC-P, ELISA - O14746

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TERT

• La telomerasi reverse transcriptasi (TERT) è la componente catalitica della telomerasi, un enzima ribonucleoproteico che mantiene le estremità dei telomeri aggiungendo ripetizioni TTAGGG. È attiva nelle cellule progenitrici e tumorali, ma inattiva o a bassissima concentrazione nelle cellule somatiche normali.
• Funziona come DNA polimerasi RNA-dipendente, catalizzando l'estensione delle estremità cromosomiche 3' utilizzando un modello di RNA interno. Il ciclo catalitico comprende il legame al primer, l'estensione e il rilascio del prodotto o la traslocazione, ed è più attivo su substrati con 2 o 3 ripetizioni telomeriche.
• L'attività di TERT è regolata da proteine associate al complesso della telomerasi, chaperoni e modificatori polipeptidici. Modula inoltre la segnalazione Wnt e svolge ruoli importanti nell'invecchiamento e nell'antiapoptosi.
• Nomi alternativi includono TP2, TRT, CMM9, EST2, TCS1, hTRT, DKCA2, DKCB4, hEST2 e PFBMFT1. Il gene TERT ha come sinonimi EST2, TCS1 e TRT.
• La localizzazione subcellulare è principalmente nucleare, inclusi nucleolo, nucleoplasma e telomeri, ma si localizza anche nei corpi PML e nel citoplasma.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e coniugazione dell'ubiquitina. Le parole chiave associano TERT al mantenimento dei telomeri, alla trascrizione inversa e a varianti patologiche come la discheratosi congenita.
• Specificità tissutale: altamente espresso nelle sottopopolazioni di timociti, intermedio nei linfociti T delle tonsille e basso o non rilevabile nei linfociti T del sangue periferico.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico compreso tra gli amminoacidi 1050-1132 di TERT umano, che bersaglia una regione C-terminale. Considerare questa posizione dell'epitopo quando si progettano reagenti di rilevazione complementari.
• Per il WB, TERT ha un peso molecolare previsto di ~127 kDa. Utilizzare condizioni riducenti e riscaldamento per dissociare i complessi. Notare che le forme fosforilate o modificate possono migrare in modo diverso; includere opportuni lisati di linee cellulari tumorali come controlli positivi.
• Nell'IHC‑P, prevedere pattern di colorazione nucleare e nucleolare nei tessuti positivi alla telomerasi. Ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene e validare con campioni di tessuto positivi e negativi noti.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevazione a seconda del formato del saggio. L'abbinamento con un anticorpo monoclonale validato può migliorare la specificità nelle configurazioni di ELISA sandwich.
• Essendo un anticorpo policlonale, la variabilità lotto per lotto deve essere valutata dall'utente finale. Convalidare le prestazioni nel sistema di campione e nell'applicazione specifici prima dell'uso di routine.

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