Anticorpo policlonale Anti-TET1 da coniglio per WB, IHC-P, ELISA - Q3URK3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della TET1

• La TET1 (Metilcitosina diossigenasi TET1) catalizza l'ossidazione sequenziale della 5-metilcitosina (5mC) in 5-idrossimetilcitosina (5hmC), 5-formilcitosina (5fC) e 5-carbossilcitosina (5caC), rappresentando un enzima chiave nella demetilazione attiva del DNA.
  Riferimenti bibliografici: PMID:20639862, PMID:21496894, PMID:21778364

• Al di là della demetilazione, la TET1 recluta complessi modificatori degli istoni per modificare l'accessibilità della cromatina, funzionando quindi sia come attivatore che come repressore trascrizionale in processi come il mantenimento delle cellule staminali, lo sviluppo delle cellule immunitarie e l'attività neurale.
  Riferimenti bibliografici: PMID:28504700, PMID:32286661

• La TET1 localizza prevalentemente nel nucleo e si associa alla cromatina, in linea con i suoi ruoli centrali nella modificazione del DNA e nella regolazione epigenetica.

• Nello sviluppo precoce, la TET1 è fondamentale per l'autorenewment delle cellule staminali embrionali e la specificazione della massa cellulare interna, bilanciando la pluripotenza e l'impegno verso i lignaggi cellulari.
  Riferimenti bibliografici: PMID:20639862, PMID:28504700

• Il gene Tet1 di topo produce almeno due isoforme principali: l'isoforma 1 è altamente espressa negli embrioni precoci e nelle cellule ES, mentre l'isoforma 2 è predominante nei tessuti differenziati e mostra proprietà di legame alla cromatina e risultati funzionali distinti, inclusa la regolazione differenziale della trasmissione sinaptica e della memoria.
  Riferimenti bibliografici: PMID:27916660, PMID:33262245, PMID:36056023

• La TET1 contribuisce alla riprogrammazione epigenetica dell'eterocromatina pericentromerica nelle cellule germinali ed è necessaria per la normale progressione meiotica nelle ovociti.
  Riferimenti bibliografici: PMID:34166371, PMID:23151479

• L'espressione della TET1 è rilevata in una varietà di tessuti, con livelli più elevati in ovociti, embrioni precoci, cellule ES e cervello; esistono pattern di espressione specifici per isoforma, con l'isoforma 1 arricchita nelle cellule gliali e l'isoforma 2 nei neuroni.
  Riferimenti bibliografici: PMID:20639862, PMID:24357321, PMID:28531272, PMID:33262245

• La TET1 è soggetta a molteplici modificazioni post-traduzionali (fosforilazione, glicosilazione, ubiquitinazione) e contiene domini a dito di zinco essenziali per il legame con il DNA.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1749–1902 dell'isoforma 1 della TET1 di topo (NP_001240786.1), una regione che potrebbe essere conservata tra uomo, topo e ratto, a supporto della reattività incrociata osservata.
• Per Western blot, ci si aspetta una banda di circa 219 kDa; tuttavia, a causa della presenza di isoforme e di potenziali modificazioni post-traduzionali, validare la banda rilevata utilizzando controlli appropriati e marcatori di peso molecolare.
• L'applicazione IHC-P può richiedere l'ottimizzazione del recupero antigenico e delle condizioni di rilevazione, poiché l'espressione della TET1 può essere bassa o limitata a specifici tipi cellulari in molti tessuti.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità tra lotti; si consiglia di includere controlli positivi e negativi e di eseguire esperimenti di titolazione per ogni nuovo lotto.
• L'utilizzo in ELISA è stato riportato; assicurarsi che l'antigene di rivestimento e il sistema di rilevazione siano compatibili e validare con campioni positivi e negativi noti.
• Per le applicazioni che richiedono la distinzione tra isoforme, tenere presente che la regione epitopica può essere presente in più isoforme; verificare la specificità utilizzando sistemi di knockdown o sovraespressione specifici per l'isoforma.

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