Anti-TET2 Rabbit pAb per WB, IHC-P, ELISA - Q6N021

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TET2

• TET2 (diossigenasi della metilcitosina TET2) è noto anche come KIAA1546, MDS e IMD75. Appartiene alla famiglia di diossigenasi TET, che svolgono ruoli cruciali nella demetilazione del DNA.
• Agisce come una diossigenasi che catalizza l'ossidazione sequenziale della 5-metilcitosina (5mC) a 5-idrossimetilcitosina (5hmC), 5-formilcitosina (5fC) e 5-carbossicitosina (5caC), avviando la demetilazione attiva del DNA.
• Agisce preferenzialmente sulla 5-idrossimetilcitosina nei motivi CpG ed è essenziale per la regolazione epigenetica della trascrizione.
• Media inoltre il reclutamento della O-GlcNAc transferasi OGT ai siti di inizio della trascrizione ricchi di CpG, promuovendo la GlcNAcilazione dell'istone H2B e contribuendo ulteriormente alla regolazione della cromatina.
• Si localizza nel nucleo ed è associato ai cromosomi, in linea con il suo ruolo nella modificazione del DNA e nella dinamica della cromatina.
• È ampiamente espresso, con i livelli più elevati nelle cellule ematopoietiche, in particolare nei granulociti; l'espressione è ridotta nei granulociti dei pazienti con sindromi mielodisplastiche, collegando TET2 all'ematopoiesi e alla patologia.
• Presenta molteplici domini e modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e glicosilazione, che possono regolarne l'attività e la stabilità.
• È classificato come soppressore tumorale ed è frequentemente mutato nelle neoplasie mieloidi; è inoltre coinvolto nel controllo del ciclo cellulare e nello splicing alternativo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 1833–2002 nella regione C-terminale, pertanto si prevede che l'anticorpo riconosca il TET2 a lunghezza intera. Verificare la reattività se si stanno studiando isoforme o troncamenti N-terminali.
• Per il Western blot (WB), utilizzare un gel di poliacrilammide a bassa percentuale (ad es. 6–8%) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per le proteine ad alto peso molecolare (~224 kDa). Si raccomanda un sistema di trasferimento umido con tempi di trasferimento prolungati.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), validare l'anticorpo in tessuti fissati in formalina e inclusi in paraffina noti per esprimere TET2 (ad es. midollo osseo, milza). Le condizioni di recupero antigenico e di rilevazione devono essere ottimizzate empiricamente.
• Sebbene sia riportata la reattività crociata dell'anticorpo con topo e ratto, confermare la reattività nel proprio specifico sistema modello e tipo di campione.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo di proteina TET2 ricombinante o lisati cellulari per stabilire le condizioni del saggio, poiché gli effetti della matrice possono variare.

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