Anticorpo policlonale rabbit Anti-TET2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q6N021

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TET2

• TET2 è una metilcitrosina diossigenasi che catalizza l'ossidazione iterativa della 5-metilcitrosina (5mC) in 5-idrossimetilcitrosina (5hmC), 5-formilcitrosina (5fC) e 5-carbossilcitrosina (5caC), svolgendo un ruolo chiave nella demetilazione attiva del DNA.
• L'enzima agisce preferenzialmente sulla 5-idrossimetilcitrosina nei motivi CpG e la sua attività è fondamentale per la regolazione epigenetica della trascrizione nei genomi dei mammiferi.
• TET2 svolge anche una funzione non catalitica, reclutando la O-GlcNAc transferasi (OGT) nei siti di inizio della trascrizione ricchi di CpG, promuovendo così la GlcNAcilazione dell'istone H2B e influenzando l'espressione genica.
• La proteina si localizza nel nucleo e si associa ai cromosomi, in linea con il suo ruolo nella modificazione della cromatina e nella demetilazione del DNA.
• TET2 è espressa in modo diffuso ma raggiunge i livelli più alti nelle cellule ematopoietiche, in particolare nei granulociti; la sua espressione è notevolmente ridotta nei granulociti di pazienti affetti da sindromi mielodisplastiche (MDS).
• La proteina presenta molteplici domini e modifiche, tra cui un dominio diossigenasi, siti di legame per ferro e zinco e modifiche post-traduzionali regolatorie come acetilazione, fosforilazione e O-GlcNAcilazione.
• TET2 è considerato un soppressore tumorale: alterazioni genetiche sono osservate frequentemente nelle neoplasie mieloidi e in altri tipi di cancro, a conferma della sua importanza nella differenziazione ematopoietica e nella stabilità genomica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 1833–2002) dell'isoforma lunga di TET2 umano; si prevede che questo anticorpo riconosca TET2 a lunghezza intera, ma potrebbe non rilevare troncamenti N-terminali o isoforme privi di questa regione.
• Per il Western blotting, dato l'elevato peso molecolare previsto (224 kDa), si consiglia di utilizzare gel di poliacrilammide a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati per garantire un trasferimento efficiente sulla membrana.
• Nelle applicazioni di colorazione cellulare o tissutale (IHC-P, IF/ICC), tieni conto che TET2 è principalmente nucleare; una permeabilizzazione adeguata e una controcolorazione nucleare possono facilitare la localizzazione del segnale.
• Valida la reattività dell'anticorpo nel tipo cellulare o tessuto di interesse, soprattutto tenendo conto dell'espressione tessuto-specifica e della downregolazione correlata alla malattia nei campioni ematopoietici.
• Ottimizza le diluizioni dell'anticorpo per ogni applicazione utilizzando un controllo positivo noto (ad esempio, cellule con espressione confermata di TET2), poiché non sono forniti dati di prestazioni quantitativi.

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