Anticorpo monoclonale di coniglio anti-TFAM per WB, IHC-P, IF-P, ELISA - Q00059

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TFAM

• TFAM (Fattore di trascrizione A, mitocondriale) è un membro della famiglia proteica HMGB ed esiste in diversi isoforme a causa dello splicing alternativo.
• Si lega al promotore del filamento leggero mitocondriale e funge da attivatore trascrizionale chiave. Riferimenti correlati: PMID:29445193 PMID:32183942
• Forma il complesso di inizio della trascrizione mitocondriale con TFB2M e POLRMT; recluta POLRMT ai promotori e induce cambiamenti strutturali che consentono la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:29149603 PMID:20410300
• Migliora il riconoscimento del promotore da parte dell'RNA polimerasi mitocondriale e promuove l'inizio della trascrizione dai promotori HSP1 e del filamento leggero; possiede attività di svolgiamento del DNA. Riferimenti correlati: PMID:22037172
• Piega il DNA del promotore del filamento leggero in una forma a U attraverso i suoi domini HMG, facilitando l'inizio della trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:1737790
• Necessario per il mantenimento dei normali livelli di DNA mitocondriale; può anche organizzare e compattare il mtDNA. Riferimenti correlati: PMID:19304746 PMID:22841477 PMID:22037171
• Localizza nella matrice mitocondriale e nei nucleoidi; subisce fosforilazione.
• Mutazioni patogene in TFAM causano la sindrome da deplezione del DNA mitocondriale 15 (MTDPS15), una malattia mitocondriale primaria.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 100-200 di TFAM umano; questa regione potrebbe essere conservata in topo e ratto, in linea con i dati di reattività crociata.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 29 kDa; considerare l'uso di estratti cellulari totali o mitocondriali per una rilevazione ottimale.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P) e l'immunoistochimica (IHC-P), sono raccomandati protocolli standard di recupero dell'antigene e permeabilizzazione; validare in tessuti di controllo positivo e negativo appropriati.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; titolare per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Eseguire sempre esperimenti pilota per confermare la specificità e le prestazioni nel proprio sistema di saggio specifico e nel tipo di campione.

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