Anticorpo monoclonale coniugato anti-TFE3 di coniglio per WB, IHC-P, ELISA - P19532

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TFE3

• TFE3 (Fattore di trascrizione E3) è un membro della famiglia MiT/TFE dei fattori di trascrizione a cerniera elica-loop-elica di base con cerniera di leucina, noto anche come bHLHe33.

• Agisce come regolatore principale della biogenesi lisosomiale e della risposta immunitaria legando le sequenze E-box e CLEAR-box (5'-CANNTG-3' e 5'-GTCACGTGAC-3') nei promotori dei geni bersaglio, controllando così l'espressione di numerosi geni lisosomiali. Riferimenti correlati: PMID:2338243 PMID:24448649 PMID:29146937

• Si dimerizza con altri membri della famiglia MiT/TFE (es. TFEB, MITF) per un efficiente legame al DNA e attivazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:24448649

• La fosforilazione dipendente da mTOR in risposta ai nutrienti porta alla ritenzione citoplasmatica e all'inattivazione; la carenza di nutrienti o lo stress lisosomiale inducono defosforilazione e traslocazione nucleare. Riferimenti correlati: PMID:24448649 PMID:31672913 PMID:36608670

• Essenziale per mantenere la pluripotenza nelle cellule staminali ematopoietiche; la localizzazione di TFE3 regolata da mTOR controlla l'uscita dalla pluripotenza, con ruoli simili nelle cellule staminali embrionali. Riferimenti correlati: PMID:30733432

• Promuove l'imbrunimento del tessuto adiposo e inibisce la differenziazione dei progenitori neuronali (per somiglianza).

• Coopera con TFEB per attivare l'espressione di CD40L nelle cellule T, contribuendo all'immunità umorale dipendente dal timo (per somiglianza).

• Localizzato subcellularmente nel citoplasma, citosol, nucleo e membrana lisosomiale; l'espressione tissutale è ubiquitaria nei tessuti fetali e adulti.

• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione; implicato in riarrangiamenti cromosomici associati al carcinoma a cellule renali e alla disabilità intellettiva legata all'X.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, utilizzare protocolli standard con una diluizione dell'anticorpo primario ottimizzata per il vostro campione. Il peso molecolare previsto è ~62 kDa; convalidare la specificità utilizzando lisati di cellule/tessuti umani, di topo o di ratto.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene (es. buffer citrato pH 6.0 o buffer EDTA pH 9.0) dovrebbero essere testate. Convalidare in tessuti di controllo positivo appropriati.
• Per l'ELISA, associare questo anticorpo a un anticorpo di rilevamento adatto e considerare l'uso della proteina TFE3 ricombinante come standard.
• Poiché l'immunogeno copre gli aminoacidi 191–440, che includono il dominio bHLH, questo anticorpo può riconoscere regioni funzionali critiche per la dimerizzazione e il legame al DNA; testare in condizioni sperimentali pertinenti.
• Notare che l'attività di TFE3 è regolata dalla fosforilazione dipendente da mTOR; considerare di verificare lo stato di fosforilazione nella vostra configurazione sperimentale.

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