Anticorpo Policlonale Anti-TFEB per WB, IP, ELISA - Q9R210

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TFEB

• Il fattore di trascrizione EB (TFEB), noto anche come Tcfeb e bHLHe35, è un membro chiave della famiglia di fattori di trascrizione MiT/TFE e funge da regolatore principale della biogenesi lisosomiale, dell'autofagia e del metabolismo energetico. Riferimenti correlati: PMID:16936731, PMID:22343943, PMID:27278822
• TFEB riconosce specificamente sequenze E-box (5'-CANNTG-'), e un efficiente legame al DNA richiede la dimerizzazione con se stesso o altri membri della famiglia MiT/TFE (ad es. TFE3, MITF). Lega anche la sequenza CLEAR-box (5'-GTCACGTGAC-3') nei promotori dei geni lisosomiali. Riferimenti correlati: PMID:16936731, PMID:27278822
• L'attività di TFEB è strettamente regolata dalla fosforilazione dipendente da MTOR: in condizioni ricche di nutrienti, la fosforilazione trattiene TFEB nel citoplasma; in seguito a digiuno o stress lisosomiale, l'inibizione di MTOR porta alla defosforilazione, traslocazione nucleare e attivazione trascrizionale dei geni target. Riferimenti correlati: PMID:35662396
• TFEB promuove l'autofagia aumentando l'espressione genica coinvolta nelle vie autofagiche e regola anche il posizionamento lisosomiale in risposta alla privazione di nutrienti inducendo l'espressione di PIP4P1. Riferimenti correlati: PMID:27278822, PMID:29146937
• TFEB svolge un duplice ruolo nell'immunità: attiva CD40L nelle cellule T per supportare le risposte anticorpali e orchestra l'immunità innata antibatterica attraverso l'alchilazione mediata dall'itaconato, che guida la biogenesi lisosomiale per l'eliminazione dei patogeni. Riferimenti correlati: PMID:16936731, PMID:24882217, PMID:27184844, PMID:35662396
• TFEB è ampiamente espresso e si sposta dinamicamente tra nucleo, citoplasma e membrana lisosomiale, consentendo risposte rapide ai segnali metabolici e immunitari.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 390–476 nella regione C-terminale di TFEB murino, un dominio che può rilevare sia le forme a lunghezza intera che quelle troncate della proteina.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali o estratti nucleari da cellule umane o murine; il trattamento con digiuno di nutrienti o Torin 1 può potenziare il segnale nucleare di TFEB e può migliorare la sensibilità di rilevamento.
• Nell'immunoprecipitazione, la concentrazione ottimale dell'anticorpo dovrebbe essere titolata per la specie target e il tipo di campione; si raccomanda l'inclusione di controlli positivi e negativi appropriati.
• Per l'ELISA, convalidare le prestazioni utilizzando proteina TFEB ricombinante o lisati cellulari caratterizzati per garantire specificità e intervallo lineare.

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