Anticorpo policlonale coniglio anti-TFF3 per WB, IF-P, ELISA - Q07654

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della TFF3

• Il fattore trifoglio 3 (TFF3), noto anche come fattore trifoglio intestinale (hITF), è una piccola proteina secreta appartenente alla famiglia dei fattori trifoglio, caratterizzata da un dominio trifoglio conservato.
• La TFF3 svolge un ruolo fondamentale nel mantenimento e nella riparazione della mucosa intestinale, promuovendo la restituzione epiteliale e agendo come motogeno per aumentare la migrazione cellulare durante la guarigione delle ferite.
• La proteina è espressa principalmente nelle cellule caliciformi dell'intestino tenue, dell'intestino crasso e del colon; è stata inoltre riportata un'espressione aggiuntiva nell'utero e in specifici nuclei ipotalamici (nucleo paraventricolare, periventricolare e sopraottico).
• La TFF3 viene sintetizzata come precursore con un peptide segnale e secreta nello spazio extracellulare, dove può interagire con le mucine per stabilizzare lo strato di muco.
• Subcellularmente, la TFF3 si localizza nella matrice extracellulare e viene secreta; è inoltre rilevata nel citoplasma, in accordo con il suo transito attraverso la via secretoria.
• La proteina matura contiene legami disolfuro intramolecolari che stabilizzano la struttura del suo dominio trifoglio, elemento essenziale per la sua attività biologica e la sua resistenza alla proteolisi.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione del peptide maturo (aa 22-94) della TFF3 umana, quindi l'anticorpo riconosce probabilmente la forma secreta e attiva della proteina.
• Per il Western blot è prevista una banda intorno ai 9 kDa, corrispondente alla forma monomerica della TFF3; le condizioni riducenti possono rompere i legami disolfuro. Si consiglia di utilizzare marcatori a basso peso molecolare e ottimizzare i tempi di trasferimento per le membrane in PVDF.
• Per l'immunofluorescenza, si raccomanda la fissazione con paraformaldeide e la permeabilizzazione per rilevare sia la TFF3 intracellulare che quella extracellulare. Eseguire la validazione su sezioni di tessuto intestinale o colonico.
• In ELISA, se si sviluppa un test sandwich, si consiglia di abbinarlo a un anticorpo di cattura che bersaglia un epitopo diverso; l'anticorpo policlonale di coniglio può essere utilizzato come reagente di rilevazione.

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