Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-TFPI per WB, ELISA - P10646

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TFPI

• TFPI (Inibitore della via del fattore tissutale), noto anche come Inibitore della via estrinseca (EPI) o Inibitore della coagulazione associato a lipoproteine (LACI), è un inibitore della serina proteasi di tipo Kunitz che regola centralmente la via estrinseca della coagulazione.
• Inibisce direttamente il fattore Xa e, in modo dipendente dal fattore Xa, inibisce il complesso fattore tissutale/fattore VIIa, sopprimendo così la generazione di trombina ed esercitando effetti antitrombotici.
• TFPI è sintetizzato principalmente nelle cellule endoteliali, in linea con il suo ruolo nell'emostasi vascolare, e viene secreto nel flusso sanguigno.
• La proteina si associa alle lipoproteine nel plasma ed è anche presente ancorata alla membrana del microsoma tramite un'ancora GPI, indicando la presenza di forme sia solubili che legate alla membrana.
• Le modificazioni post-traduzionali includono N-glicosilazione, formazione di legami disolfuro e l'attacco di un'ancora GPI al C-terminale, che sono critici per la sua stabilità e localizzazione.
• Lo splicing alternativo del gene TFPI produce multiple isoforme, che possono differire nelle loro regioni C-terminali e nell'affinità per lipoproteine e superfici cellulari.
• Data la sua funzione inibitoria, TFPI è un fattore anticoagulante chiave; carenze o disregolazione sono state implicate in disturbi trombotici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 29-224 di TFPI umano, coprendo il dominio Kunitz 1; ciò suggerisce l'idoneità per il rilevamento di isoforme di TFPI contenenti questa regione in campioni umani, di topo e di ratto.
• Per il Western blot, la banda prevista è intorno a 35 kDa; tuttavia, la glicosilazione e la potenziale rimozione dell'ancora GPI possono causare bande multiple o strisciamenti in lisati cellulari o campioni di plasma.
• Per ridurre il legame aspecifico tipico degli anticorpi policlonali, considerare l'ottimizzazione delle condizioni di blocco e lavaggio quando si utilizzano campioni complessi come il siero.
• Per applicazioni ELISA, TFPI è secreto, quindi plasma o surnatanti di coltura possono essere tipi di campioni appropriati.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo nelle vostre specifiche condizioni sperimentali, poiché è stata riportata cross-reattività con TFPI di topo e ratto ma richiede verifica nel sistema di campionamento rilevante.

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