Anticorpo monoclonale anti-TGF beta 1 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01137

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del TGF beta 1

• TGFB1 codifica la proproteina del fattore di crescita trasformante beta-1, che viene scissa proteoliticamente per generare il peptide associato alla latenza (LAP) e la citochina biologicamente attiva TGF-beta-1.
• Il TGF-beta-1 viene secreto come complesso latente inattivo; l'attivazione avviene quando le integrine (ITGAV:ITGB6 o ITGAV:ITGB8) si legano al LAP, causando una distorsione conformazionale e il rilascio della citochina attiva (PubMed:22278742, PubMed:28117447). Riferimenti correlati: PMID:22278742 PMID:28117447
• Il TGF-beta-1 attivo segnala attraverso i recettori del TGF-beta (TGFBR1 e TGFBR2), portando alla fosforilazione di SMAD2/3 e alla translocazione nucleare per regolare l'espressione genica (PubMed:20207738, PubMed:25893292, PubMed:29483653, PubMed:30696809). Riferimenti correlati: PMID:20207738 PMID:25893292 PMID:29483653 PMID:30696809
• È una citochina multifunzionale che può indurre la transizione epiteliale-mesenchimale (EMT), la migrazione cellulare e la produzione sostenuta di collagene tramite l'attivazione di CREB3L1 (PubMed:25310401, PubMed:25893292, PubMed:30696809). Riferimenti correlati: PMID:25310401 PMID:25893292 PMID:30696809
• Il TGF-beta-1 modula la differenziazione delle cellule immunitarie: ad alte concentrazioni promuove lo sviluppo delle cellule T regolatorie (Treg), mentre a basse concentrazioni con IL-6/IL-21 favorisce la differenziazione delle cellule Th17 (Per analogia).
• Nell'osso, è altamente espresso e agisce come potente stimolatore della formazione ossea osteoblastica, della chemiotassi, della proliferazione e della differenziazione; è anche abbondante nella cartilagine articolare ed è aumentato nell'osteoartrosi (PubMed:11746498, PubMed:17827158). Riferimenti correlati: PMID:11746498 PMID:17827158
• La localizzazione subcellulare è principalmente nello spazio extracellulare e nella matrice extracellulare.
• Le modifiche post-traduzionali includono la clivaggio ai residui dibasici, la formazione di legami disolfuro e la glicosilazione, che sono essenziali per il corretto ripiegamento e la dimerizzazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aminoacidi 279–390 della proproteina TGFB1 umana) rientra nel dominio LAP; pertanto, l'anticorpo può riconoscere la proproteina a lunghezza intera e il LAP, ma non necessariamente il dimero TGF‑β1 maturo. Validare la specificità di rilevamento utilizzando appropriate proteine ricombinanti o lisati cellulari.
• Per il Western Blot, ci si aspetta una banda intorno a 44 kDa corrispondente alla proproteina in condizioni riducenti; il monomero maturo (~12.5 kDa) può essere osservato o meno a seconda dell'accessibilità dell'epitopo.
• Per l'immunoistochimica e l'immunofluorescenza, considerare le condizioni di recupero dell'antigene e i metodi di fissazione, specialmente quando si lavora con tessuti ricchi di matrice extracellulare (es. osso, cartilagine) dove si accumulano i complessi latenti.
• Le prestazioni ELISA possono essere valutate rivestendo con LAP ricombinante o proproteina e testando diluizioni seriali dell'anticorpo.
• La reattività crociata con topo e ratto è riportata, ma raccomandiamo di verificare il legame nel sistema sperimentale specifico utilizzato.

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