Anticorpo Policlonale Anti-THOC4/ALYREF per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q86V81

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di THOC4/ALYREF

• THOC4/ALYREF, noto anche come subunità 4 del complesso THO, è un componente fondamentale del complesso TREX (trascrizione/esportazione) e funge da adattatore per l'esportazione di mRNA, collegando la trascrizione alla elaborazione dell'mRNA e all'esportazione nucleare degli mRNA splicingati. Riferimenti correlati: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Si lega specificamente all'mRNA splicingato ed è reclutato in modo dipendente dal cappuccio e dallo splicing vicino all'estremità 5', interagendo con la proteina di legame al cappuccio NCBP1 per assemblare il complesso TREX. Riferimenti correlati: PMID:15833825 PMID:15998806 PMID:17190602

• Media l'esportazione nucleare degli mRNA privi di introni venendo reclutato attraverso DDX39B legato ad ATP; questa via è essenziale per l'esportazione degli mRNA virali privi di introni, come quelli dell'herpesvirus associato al sarcoma di Kaposi (KSHV). Riferimenti correlati: PMID:17984224

• Agisce come adattatore ponte tra il complesso di giunzione degli esoni (EJC) e il nucleo di TREX, facilitando il passaggio dell'mRNA al recettore di esportazione NXF1-NXT1 per la translocazione attraverso il complesso dei pori nucleari. Riferimenti correlati: PMID:37020021 PMID:11675789 PMID:11707413 PMID:11979277

• Collabora con THOC5 per potenziare l'attività di legame all'RNA di NXF1 ed è necessario per la sua localizzazione al bordo nucleare, guidando così l'esportazione nucleare di mRNA specifici come HSP70. Riferimenti correlati: PMID:19165146

• Riconosce gli mRNA modificati con 5-metilcitosina (m5C) e media il loro shuttling nucleo-citoplasmatico, aggiungendo un livello di regolazione epitrascrittomico all'esportazione degli mRNA. Riferimenti correlati: PMID:28418038

• Funziona come chaperone molecolare che promuove la dimerizzazione dei fattori di trascrizione basic leucine zipper (bZIP), potenziando così l'attivazione trascrizionale. Riferimenti correlati: PMID:10488337

• Si localizza a livello subcellulare nel nucleo, negli speckles nucleari e nel citoplasma; le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, citrullinazione e fosforilazione. È espresso in una vasta varietà di tipi di cancro ed è coinvolto anche nell'allungamento della trascrizione e nella stabilità del genoma. Riferimenti correlati: PMID:12438613

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente alla regione N-terminale (aa 1–100) di THOC4/ALYREF umano. Verificare la conservazione della sequenza nel topo e nel ratto (accessioni UniProt: Q8VE80, Q6AYK3) per garantire la prevista reattività crociata basata sull'identità degli amminoacidi.
• Per il Western blot (WB), prevedere una banda a ~27 kDa. Includere lisati di cellule HeLa, HEK293 o altre cellule che esprimono THOC4 come controlli positivi; i campioni con knockdown o knockout tramite siRNA possono fungere da controlli negativi.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare il recupero dell'antigene (es. recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato) e la permeabilizzazione. THOC4/ALYREF mostra colorazione nucleare e nucleoplasmatica; eseguire una colorazione simultanea con marcatori nucleari per confermare la localizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, rivestire la piastra con il peptide immunizzante o con la proteina ricombinante THOC4/ALYREF. Titolare l'anticorpo da 1:500 a 1:32.000 e rilevare con un anticorpo secondario appropriato.
• Convalidare sempre le prestazioni nel sistema di campioni e nell'applicazione pertinenti; i controlli letterari raccomandati possono essere trovati nelle pubblicazioni citate.

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