Anticorpo monoclonale di coniglio anti timidina chinasi 1 (TK1) per WB e ELISA - P04183

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Timidina Chinasi 1

• La Timidina Chinasi 1 (TK1) è un enzima regolato dal ciclo cellulare, fondamentale per il metabolismo nucleotidico. Riferimenti correlati: PMID:9575153
• Catalizza la conversione della timidina in timidina monofosfato, il primo passaggio della via di recupero per la sintesi del DNA. Riferimenti correlati: PMID:22385435
• L'espressione di TK1 è trascrizionalmente limitata alla fase S del ciclo cellulare, in coincidenza con le oscillazioni transitorie della concentrazione intracellulare di dTTP.
• L'enzima fosforila anche i profarmaci nucleosidici analoghi, inclusi agenti anticancro e antivirali come AraC e AZT. Riferimenti correlati: PMID:22385435
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 25,5 kDa e contiene domini di legame per l'ATP e per metalli (zinco), oltre a siti di fosforilazione e acetilazione.
• TK1 appartiene alla famiglia delle timidina chinasi ed è parte del proteoma di riferimento.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per Western blot (WB), utilizzare condizioni standard di SDS-PAGE riducente e trasferimento. Il peso molecolare previsto della proteina bersaglio è di circa 25 kDa; si consiglia di caricare una scala proteica precolorata per confermarlo. Validare la specificità dell'anticorpo in linee cellulari note per esprimere TK1, idealmente dopo sincronizzazione per arricchire le cellule in fase S.
• Per ELISA, la sequenza dell'immunogeno (amminoacidi 1–100) può essere utilizzata per rivestire le piastre in ELISA diretta. In alternativa, è possibile sviluppare un formato di cattura che utilizzi l'anti-TK1 come rivelazione; ottimizzare le condizioni di rivestimento e blocco.
• A causa dell'espressione dipendente dal ciclo cellulare, l'intensità del segnale può variare; inserire controlli appropriati (ad es. lisati di fase G1 vs fase S) per valutare la specificità.

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