Anticorpo Policlonale Anti-Timidilato Sintasi (TYSY), Convalidato KO - P04818

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Timidilato Sintasi (TYSY)

• La timidilato sintasi (TYMS, nota anche come TYSY, TS, TMS, HST422, SY) è un enzima fondamentale nella sintesi de novo del timidilato (dTMP), un precursore essenziale per la replicazione e la riparazione del DNA.
• Catalizza la metilazione riduttiva del 2′-deossiuridina 5′-monofosfato (dUMP) in timidina 5′-monofosfato (dTMP), utilizzando il 5,10-metilenetetraidrofolato come donatore di un carbonio e agente riducente.
• Contribuisce alla biosintesi de novo del timidilato sia a livello mitocondriale che nucleare, sostenendo l'integrità del genoma in questi compartimenti.
• Si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nel mitocondrio, inclusa la matrice mitocondriale e la membrana interna, riflettendo il suo duplice ruolo nella sintesi del DNA.
• È soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione e ubiquitinazione, che possono regolarne l'attività e la stabilità.
• Lo splicing alternativo genera più isoforme, potenzialmente diversificando i suoi ruoli funzionali.
• Varianti associate a patologie sono collegate alla discheratosi congenita e ad altre malattie, sottolineandone la rilevanza clinica.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 220–313) della TYSY umana, che può conferire specificità tra specie grazie all'elevata conservazione di questo dominio. Si consiglia di convalidare la reattività crociata nel proprio sistema modello.
• Per il western blotting, il peso molecolare atteso è di circa 36 kDa. È possibile analizzare sia le frazioni nucleari che citoplasmatiche; si può anche considerare l'arricchimento mitocondriale.
• In immunohistochimica (IHC) e immunofluorescenza (IF/ICC), si possono osservare pattern di colorazione sia nucleari che citoplasmatici. Ottimizzare il recupero dell'antigene e utilizzare controlli negativi appropriati.
• Durante l'allestimento di ELISA o altri saggi quantitativi, includere proteina TYSY ricombinante o lisati positivi noti come standard per confermare sensibilità e linearità.

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