Anticorpo policlonale coniglio anti-TIGIT per WB, ELISA - Q495A1

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del TIGIT

• Il TIGIT (recettore immunologico delle cellule T con domini Ig e ITIM) è un recettore inibitorio appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, noto anche come VSIG9, VSTM3 o WUCAM. Contiene un dominio Ig-like di tipo V extracellulare, un'elica transmembrana e un motivo ITIM citoplasmatico.
• Agisce come un importante regolatore negativo delle risposte delle cellule T e delle cellule NK. Inibisce l'attivazione delle cellule T promuovendo la generazione di cellule dendritiche immunoregolatorie mature. Riferimenti correlati: PMID:19011627
• Al legame con i suoi ligandi PVR/CD155 o NECTIN2/CD112 sulle cellule presentanti l'antigene, il TIGIT viene fosforilato dalle chinasi Src FYN o LCK, portando al reclutamento di GRB2 e SHIP1/INPP5D e alla successiva inibizione delle vie di segnalazione PI3K e MAPK. Riferimenti correlati: PMID:23154388
• In un distinto meccanismo inibitorio, il TIGIT si associa alla beta-arrestina-2 per reclutare SHIP1, che sopprime l'auto-ubiquitinazione di TRAF6 e inibisce la via di segnalazione NF-kappa-B. Riferimenti correlati: PMID:24817116
• Agisce anche come recettore per NECTIN4, attraverso il quale inibisce la citotossicità delle cellule NK. Riferimenti correlati: PMID:32503945
• Localizzato sulla membrana cellulare come proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo.
• Espresso a bassi livelli sulle cellule T CD4+ di memoria e regolatorie periferiche e sulle cellule NK, ed è upregolato a seguito dell'attivazione di queste cellule.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione del motivo ITIM dopo il legame del ligando; classificato sotto le parole chiave Fosfoproteina, Glicoproteina, Legame disolfuro e Splicing alternativo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 22–141) copre l'intero dominio Ig-like extracellulare, il che potrebbe consentire il rilevamento sia del TIGIT monomerico che di quello legato al ligando.
• Per il Western blotting, il peso proteico previsto è di circa 26 kDa. Si consiglia di utilizzare condizioni SDS-PAGE riducenti e di includere appropriati controlli positivi come lisati di cellule T attivate o cellule NK.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare del rivestimento con l'immunogeno ricombinante o la proteina TIGIT a lunghezza intera. Validare la specificità utilizzando linee cellulari con knockdown o knockout di TIGIT, se disponibili.
• Poiché l'anticorpo mostra reattività crociata con il TIGIT murino, può essere preso in considerazione per l'uso in modelli murini per studi sui checkpoint immunitari. Titolare e validare nel sistema di campioni pertinente prima degli esperimenti quantitativi.

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