Anticorpo policlonale coniglio anti-TIM-3/HAVCR2 per WB, IHC-P, ELISA - Q8TDQ0

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di TIM-3/HAVCR2

• TIM-3 (recettore cellulare 2 del virus dell'epatite A) è una proteina transmembrana di tipo I appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline e alla famiglia TIM, nota anche come proteina 3 contenente dominio immunoglobulina e mucina delle cellule T (TIMD-3) e CD366.
• Funziona principalmente come recettore di checkpoint immunitario inibitorio sulle cellule T, attenuando la segnalazione TCR e promuovendo l'esaurimento delle cellule T; inibisce le risposti auto- e alloimmuni mediate da Th1, contribuendo alla tolleranza immunologica (PMID:14556005).
  Riferimenti correlati: PMID:14556005
• Agisce come recettore per la galectina-9 (LGALS9), che induce l'apoptosi delle cellule T e sopprime le funzioni effetrici, sebbene questa interazione sia stata dibattuta (PMID:16286920, PMID:24337741, PMID:23555261).
  Riferimenti correlati: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• Si lega anche alla fosfatidilserina (PtSer) in modo dipendente dal calcio, mediando la fagocitosi delle cellule apoptotiche e regolando l'immunità innata, in particolare nelle cellule dendritiche e nei macrofagi (PMID:24825777).
  Riferimenti correlati: PMID:24825777
• Espresso in vari sottogruppi di cellule immunitarie: linfociti Th1, cellule T regolatorie (Tregs), cellule dendritiche, cellule natural killer (NK) e tessuti epiteliali; l'espressione è up-regolata nelle infezioni virali croniche come HCV e HIV, contribuendo all'esaurimento immunitario.
• Gioca un duplice ruolo nell'immunità innata: sulle cellule NK, può potenziare la produzione di IFN-gamma in risposta alla LGALS9 (PMID:22323453) o sopprimere la citotossicità mediata dalle cellule NK (PMID:22383801).
  Riferimenti correlati: PMID:22323453 PMID:22383801
• Subisce modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione, palmitoilazione e fosforilazione; presenta ponti disolfuro e un dominio di tipo V simile a Ig essenziale per il legame del ligando.
• Localizzazione subcellulare: prevalentemente sulla membrana cellulare e alle giunzioni cellulari, dove partecipa alla formazione della sinapsi immunitaria e alla segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è una proteina ricombinante corrispondente al dominio extracellulare (aa22-202), adatta per rilevare il TIM-3 nativo e denaturato in WB, IHC-P ed ELISA.
• Per l'analisi WB, considerare l'uso di condizioni riducenti e lisati cellulari totali da Jurkat o cellule T primarie attivate per confermare la banda prevista a circa 33 kDa, sebbene la glicosilazione possa causare un peso molecolare apparente superiore.
• Per IHC-P, potrebbero essere richiesti metodi di recupero dell'antigene (es. tampone citrato, pH 6.0); validare il pattern di colorazione in tessuti di tonsilla umana o linfonodi, con appropriati controlli negativi.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere esaminato come reagente di cattura o di rilevamento; eseguire titrazioni a scacchiera con TIM-3 ricombinante rivestito e campioni positivi noti.
• Data la riportata reattività incrociata con topo e ratto, considerare la verifica dell'omologia di sequenza della regione immunogenica tra le specie e validare l'anticorpo in modelli di roditori pertinenti (es. lisati di milza di topo, sezioni di tessuto di ratto).

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