Anticorpo monoclonale di coniglio anti-TIRAP per WB, IHC-P, ELISA - P58753

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TIRAP

• TIRAP (proteina adattatrice contenente il dominio del recettore Toll/interleuchina-1), nota anche come MAL (proteina adattatrice simile a MyD88), è un adattatore chiave nella segnalazione immunitaria innata.
• Media la segnalazione a valle dei recettori TLR2, TLR4 e RAGE, collegandoli agli effettori a valle.
• In seguito all'attivazione del recettore, TIRAP recluta IRAK2 e TRAF-6, portando all'attivazione di NF-kappa-B e delle MAP chinasi (ERK1/2, JNK), favorendo così la trascrizione di citochine pro-infiammatorie come TNF e IL-6.
• TIRAP è localizzata sia nel citoplasma sia sulla membrana cellulare, in linea con il suo ruolo di collegamento tra i recettori di membrana e le cascate di segnalazione intracellulari.
• La proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina, che possono regolarne l'attività e le interazioni.
• TIRAP è ampiamente espressa, con i livelli più elevati nel fegato, nei reni, nella milza, nel muscolo scheletrico e nel cuore, ed è rilevabile nei leucociti del sangue periferico, nei polmoni e in altri tessuti.
• Il gene TIRAP produce molteplici isoforme attraverso lo splicing alternativo, consentendo potenzialmente una regolazione più fine delle risposte immunitarie.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, è attesa una banda specifica intorno a 24 kDa; si consiglia di utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio linee cellulari note per esprimere TIRAP) e di validare il risultato nel proprio sistema di campionamento.
• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–100); quando si lavora con campioni a reattività crociata, assicurarsi che l'epitopo bersaglio sia conservato tra le specie (umano, topo, ratto).
• Nella IHC-P, ottimizzare il recupero antigenico e la diluizione dell'anticorpo; tessuti ad alta espressione, come fegato o reni, possono fungere da solidi controlli positivi.
• L'ELISA può essere utilizzato per quantificare TIRAP in lisati o proteine purificate; validare la rilevazione utilizzando la proteina TIRAP ricombinante.
• Dato il ruolo di TIRAP nell'immunità innata, la stimolazione con agonisti dei TLR (ad esempio LPS) può aumentare i livelli di TIRAP nei modelli sperimentali.

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