Anticorpo Monoclonale Anti-TKT/Transchetolasi per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P29401

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione della TKT/Transchetolasi

• Catalizza il trasferimento reversibile di un gruppo chetolico a due atomi di carbonio dalla sedoeptulosio-7-fosfato alla gliceraldeide-3-fosfato, producendo xilulosio-5-fosfato e ribosio-5-fosfato nella via dei pentoso fosfati (PubMed:20667822, PubMed:27259054, PubMed:31534226). Riferimenti correlati: PMID:20667822, PMID:27259054, PMID:31534226
• Richiede la tiamina pirofosfato (TPP) come cofattore; forma un intermedio covalente con la TPP durante la catalisi.
• Può anche utilizzare il fruttosio-6-fosfato come donatore di chetosi, collegando potenzialmente la glicolisi alla via dei pentoso fosfati.
• Esiste come omodimero; la struttura tridimensionale è stata risolta, con ciascuna subunità che lega ioni metallici come Ca²⁺ e Mg²⁺.
• Sottoposto a molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina (legame isopeptidico).
• Mutazioni nella TKT causano una sindrome nota come SDDHD (Bassa statura, Ritardo dello sviluppo e Difetti cardiaci congeniti).
• Varianti trascrizionali con splicing alternativo producono molteplici isoforme con proprietà regolatorie potenzialmente distinte.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 281–380 della TKT umana, una regione che potrebbe rappresentare un epitopo accessibile in superficie nell'omodimero nativo. Per l'immunoprecipitazione o la citometria a flusso, considerare condizioni di lisi delicate per preservare la conformazione nativa.
• Per il Western blot, la banda prevista è di circa 68 kDa; utilizzare percentuali di gel appropriate (ad es. SDS-PAGE 8–10%) e validare le diluizioni dell'anticorpo con un lisato di controllo positivo pertinente (ad es. umano, topo o ratto).
• Nelle applicazioni IHC-P e IF/ICC, si raccomandano i passaggi standard di recupero dell'antigene e di blocco; la reattività crociata con tessuti di topo e ratto dovrebbe essere validata nel tuo specifico contesto sperimentale.
• Valutare le concentrazioni di lavoro ottimali individualmente per ELISA e altre applicazioni; la consistenza lotto per lotto è tipicamente elevata con gli anticorpi monoclonali ricombinanti.

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