Anticorpo policlonale anti-TLR6 di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y2C9

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del TLR6

• TLR6 (Toll-like receptor 6) è un membro della famiglia dei recettori Toll-like (TLR), che svolge un ruolo fondamentale nel riconoscimento dei patogeni e nell'attivazione dell'immunità innata. È una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo contenente un dominio extracellulare con ripetizioni ricche di leucina (LRR), un dominio transmembrana e un dominio citoplasmatico Toll/interleuchina-1 (TIR).
• TLR6 riconosce specificamente i lipopeptidi diacilati e, in minor misura, triacilati da batteri Gram-positivi e funghi. Forma un cluster di attivazione con TLR2, CD14 e CD36 sulla superficie cellulare, innescando la segnalazione dalle membrane lipidiche (raft) e il successivo targeting dell'apparato di Golgi. Riferimenti correlati: PMID:16880211 PMID:20037584
• La segnalazione a valle di TLR2:TLR6 è mediata tramite MYD88 e TRAF6, portando all'attivazione di NF-kappa-B, alla secrezione di citochine e alla risposta infiammatoria. In cooperazione con TLR2, riconosce componenti microbici come MALP-2 micoplasmico, fattore solubile della tubercolosi (STF), modulina solubile in fenolo (PSM) e OspA-L di B. burgdorferi. Riferimenti correlati: PMID:11441107
• In una via distinta, TLR6 può complessarsi con TLR4 per promuovere l'infiammazione sterile in monociti/macrofagi in risposta alla lipoproteina a bassa densità ossidata (oxLDL) o all'amiloide-beta 42, con CD36 che funge da sensore iniziale. Questo porta alla produzione dipendente da NF-kappa-B di CXCL1, CXCL2 e CCL9 (tramite MYD88) e CCL5 (tramite TICAM1), nonché alla secrezione di IL1B. Riferimenti correlati: PMID:11441107 PMID:20037584
• A livello subcellulare, TLR6 si trova sulla membrana cellulare, all'interno di vescicole citoplasmatiche, sulla membrana del fagosoma, nelle membrane lipidiche e nell'apparato di Golgi, riflettendo il suo traffico dinamico dopo l'attivazione.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali inclusa la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, coerenti con la sua presenza nella via secretoria e sulla superficie cellulare.
• TLR6 è espresso nei monociti, nelle cellule dendritiche immature CD11c+, nelle cellule pre-dendritiche plasmacitoidi e nelle cellule endoteliali dei microvasi dermici, indicando il suo ruolo nella sorveglianza immunitaria nei tessuti di barriera.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme, che possono modulare la specificità del ligando o gli output di segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione C-terminale (aa 697–796) del TLR6 umano, che probabilmente corrisponde al dominio citoplasmatico. Questa progettazione favorisce il riconoscimento del TLR6 totale indipendentemente dalla glicosilazione o dallo shedding del dominio extracellulare.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di ~92 kDa, ma la forma glicosilata matura spesso migra a un peso molecolare apparente superiore. Utilizzare condizioni riducenti e validare la specificità della banda con controlli appropriati.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ci si aspetta una colorazione della membrana plasmatica e delle vescicole intracellulari. È richiesta la permeabilizzazione con detergente per il rilevamento dei pool intracellulari. La colorazione combinata con marcatori di organelli può rivelare il traffico indotto dall'attivazione.
• L'anticorpo mostra reattività incrociata con il TLR6 umano e murino; verificare la reattività nella specie e nel tessuto desiderati mediante controlli positivi e negativi.
• Le applicazioni ELISA possono essere sviluppate utilizzando l'anticorpo policlonale come reagente di cattura o di rilevamento; considerare l'abbinamento con un anticorpo monoclonale per una maggiore specificità.

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