Anticorpo policlonale di coniglio anti-TLR7 per WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - Q9NYK1

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di TLR7

• TLR7 è un recettore endosomiale che riconosce l'RNA a singolo filamento contenente uridina proveniente dai virus, avviando risposte immunitarie innate e adattative (PubMed:14976261, PubMed:32433612, PubMed:12738885).
  Riferimenti correlati: PMID:14976261 PMID:32433612 PMID:12738885
• Il legame con il ligando induce la dimerizzazione di TLR7 e il reclutamento dell'adattatore MYD88, formando il complesso Myddosome e portando all'attivazione di NF-kB e IRF7 e alla successiva produzione di citochine/interferone (PubMed:27742543, PubMed:32706371).
  Riferimenti correlati: PMID:27742543 PMID:32706371
• TLR7 è localizzato nel reticolo endoplasmatico, negli endosomi, nei lisosomi e nei fagosomi, consentendogli di rilevare i patogeni internalizzati.
• È altamente espresso nelle cellule dendritiche plasmacitoidi, nelle cellule mononucleate del sangue periferico e in tessuti quali cervello, placenta, milza e polmone (PubMed:32706371).
  Riferimenti correlati: PMID:32706371
• In quanto membro della famiglia dei recettori Toll-like, TLR7 contiene un dominio extracellulare ricco di ripetizioni di leucina per il legame con il ligando e un dominio TIR citoplasmatico per la trasduzione del segnale.
• Le modifiche post-traduzionali e le varianti genetiche di TLR7 sono implicate nel lupus eritematoso sistemico, sottolineandone il ruolo nell'autoimmunità.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 30–230), rendendo questo anticorpo adatto al riconoscimento del TLR7 a lunghezza completa; per una rilevazione ottimale, si consiglia di utilizzare lisati arricchiti in endosomi.
• Per il Western blot, eseguire una SDS-PAGE in condizioni riducenti e ricercare una banda a circa 121 kDa; validare il segnale in linee cellulari o tessuti che esprimono TLR7.
• Per l'immunofluorescenza e l'IF-P, includere una fase di permeabilizzazione (ad es. Triton X-100 allo 0,1%) per consentire l'accesso ai compartimenti intracellulari; eseguire una co-colorazione con marcatori degli organelli per confermare la localizzazione endosomiale/lisosomiale.
• Nelle applicazioni ELISA, testare l'anticorpo sia come reagente di cattura sia come reagente di rilevazione; abbinarlo a un anticorpo di rilevazione compatibile ed eseguire una titolazione con uno standard di TLR7 ricombinante.
• Quando si utilizzano campioni murini o di ratto, verificare sperimentalmente la reattività a causa delle differenze di sequenza tra le specie; includere un controllo positivo insieme ai campioni sperimentali.

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