Anticorpo monoclonale di coniglio anti-TNF-α per WB, IP, IF/ICC, ELISA - P01375

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del TNF-α

• Il fattore di necrosi tumorale (TNF-α), noto anche come cachettina, è una citochina pleiotropica secreta prevalentemente dai macrofagi e classificata nella superfamiglia dei ligandi del fattore di necrosi tumorale (TNFSF2).
• Legandosi ai suoi recettori TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, regola la morte cellulare, la sopravvivenza e le risposte infiammatorie.
• Il TNF-α è un potente pirogeno che induce febbre direttamente o tramite secrezione di interleuchina-1, ed è implicato nell'induzione della cachessia.
• Compromette la funzione delle cellule T regolatorie (Treg) nell'artrite reumatoide aumentando l'espressione della proteina fosfatasi 1 (PP1), che defosforila FOXP3 in Ser-418, rendendo le Treg funzionalmente difettose. Riferimenti correlati: PMID:23396208
• Agisce come mediatore chiave della morte cellulare nell'azione antitumorale dei neutrofili stimolati da BCG combinati con mimetici DIABLO/SMAC nelle cellule del carcinoma della vescica. Riferimenti correlati: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Il TNF-α promuove l'angiogenesi inducendo sinergicamente la produzione di VEGF con IL1B e IL6. Riferimenti correlati: PMID:12794819
• Subcellularmente, il TNF-α esiste come proteina transmembrana sulla membrana cellulare e viene clivato in una forma secreta; viene rilevato sulla membrana e nelle forme secrete.
• Le parole chiave includono: citochina, glicoproteina, lipoproteina, legame disolfuro, fosfoproteina e proteoma di riferimento.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 77-233), pertanto l'anticorpo può rilevare sia le forme transmembrana che quelle clivate solubili del TNF-α.
• Per il Western blot, potrebbe essere osservata una banda vicino a 26 kDa (forma a lunghezza intera) o 17 kDa (forma clivata) a seconda della preparazione del campione; si raccomandano condizioni riducenti.
• Nell'immunoprecipitazione, verificare la compatibilità dell'anticorpo con la conformazione nativa; considerare l'uso di appropriati buffer di lisi.
• Per ELISA e immunofluorescenza, convalidare in appropriati sistemi cellulari (es. macrofagi stimolati con LPS) per garantire la specificità.

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