Anticorpo policlonale coniglio anti-TNF-α per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01375

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del TNF-α

• Il TNF-α (cachectina, TNFSF2) è una citochina pro-infiammatoria della superfamiglia dei fattori di necrosi tumorale, secreta principalmente dai macrofagi. Si lega ai recettori TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR per mediare diverse risposte cellulari.
• Agisce come un potente pirogeno che causa febbre direttamente o tramite la secrezione di interleuchina-1 ed è implicato nell'induzione della cachessia. In determinate condizioni, può stimolare la proliferazione e la differenziazione cellulare.
• Compromette la funzione delle cellule T regolatorie (Treg) nell'artrite reumatoide sovraregolando la proteina fosfatasi 1 (PP1), che defosforila FOXP3 alla Serina-418, inattivandolo. Riferimenti correlati: PMID:23396208
• Agisce come mediatore chiave della morte cellulare nell'azione antitumorale dei neutrofili stimolati con BCG combinati a un mimetic DIABLO/SMAC nelle linee cellulari di cancro della vescica. Riferimenti correlati: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• Svolge un ruolo nell'angiogenesi inducendo sinergicamente la produzione di VEGF con IL1B e IL6. Riferimenti correlati: PMID:12794819
• Induce resistenza all'insulina negli adipociti inibendo la fosforilazione della tirosina di IRS1 indotta dall'insulina e l'assunzione di glucosio, in parte attraverso la degradazione di GKAP42.
• Subcellolarmente, il TNF-α si trova sulla membrana cellulare come proteina transmembrana ed è anche secreto in forma solubile.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 77-233 del TNF umano (NP_000585.2), e bersaglia una regione comune sia alla forma legata alla membrana che a quella solubile. Per il Western blotting, si consiglia di utilizzare lisati di macrofagi stimolati o proteina ricombinante come controllo positivo.
• Per IHC-P, potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del recupero dell'antigene; un tampone citrate mediato dal calore (pH 6.0) è un punto di partenza consigliato.
• In IF-P, la permeabilizzazione della membrana deve essere ottimizzata per rilevare le pool intracellulari di TNF-α.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare dell'abbinamento di questo anticorpo policlonale con un anticorpo monoclonale corrispondente per i formati di cattura-rilevamento.
• È indicata la reattività incrociata con il TNF-α di topo e ratto, che offre flessibilità per gli studi traslazionali, ma si consiglia la validazione specifica per specie.

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