Anticorpo Policlonale Rabbit Anti-TNFα per WB e ELISA - P16599

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di TNFα

• TNFα, noto anche come cachectina o membro 2 della superfamiglia dei ligandi del fattore di necrosi tumorale, è una citochina multifunzionale secreta principalmente da macrofagi attivati.
• Medita i suoi effetti biologici legandosi a TNFRSF1A/TNFR1 e TNFRSF1B/TNFBR, attivando pathway che possono portare all'apoptosi o alla sopravvivenza cellulare.
• Questa citochina è un potente pirogeno, causa febbre direttamente e stimolando la secrezione di interleuchina-1, ed è implicata nell'induzione della cachessia.
• TNFα svolge un ruolo nella resistenza all'insulina inibendo la fosforilazione della tirosina di IRS1 indotta dall'insulina e promuovendo la degradazione della proteina GKAP42 negli adipociti.
• Promuove sinergicamente l'angiogenesi con IL1B e IL6 induttendo la produzione di VEGF, e stimola anche l'osteoclastogenesi, mediando quindi il riassorbimento osseo.
• La forma del dominio intracellulare (ICD) di TNFα, generata dal processamento proteolitico, può indurre la produzione di IL12 nelle cellule dendritiche.
• Subcellularmente, TNFα è localizzato sulla membrana cellulare come proteina transmembrana, ma può essere secreta in forma solubile dopo la scissione.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono glicosilazione, miristoilazione, fosforilazione e formazione di ponti disolfuro, che sono critiche per la sua struttura e funzione.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 80-235 di TNFα di ratto, e copre probabilmente il dominio extracellulare; tenere conto che l'anticorpo policlonale può rilevare sia la forma precursore che quella matura secreta.
• Per Western blot è prevista una banda intorno ai 26kDa; validare l'anticorpo nel sistema di campioni pertinente per confermare la specificità, poiché possono comparire bande aggiuntive dovute a intermedi di processamento o reattività crociata.
• Data l'ampia reattività crociata prevista, verificare la rilevazione di TNFα da uomo, topo e altre specie utilizzando controlli positivi appropriati.
• Si raccomanda l'ottimizzazione dei fattori di diluizione e delle condizioni di incubazione per ogni saggio (WB, ELISA) e matrice biologica.

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