Anticorpo policlonale coniglio anti-TNFAIP3 per WB, IHC-P, ELISA - P21580

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del TNFAIP3

• La proteina 3 indotta dal fattore di necrosi tumorale alfa (TNFAIP3), nota anche come A20, è un enzima di modifica dell'ubiquitina che possiede sia attività ligasi dell'ubiquitina che deubiquitinasi.
• Gioca un ruolo critico nella terminazione dell'attivazione di NF-kappa-B nelle risposte immunitarie e infiammorie innescate da citochine (es. TNF, IL-1 beta) e modelli molecolari associati ai patogeni tramite i recettori Toll-like (TLRs).
• Il TNFAIP3 funziona all'interno di un complesso di modifica dell'ubiquitina che include RNF11, ITCH e TAX1BP1 per garantire una segnalazione infiammatoria transitoria. Deubiquitina le catene poliubiquitinate legate a 'Lys-63' sugli intermedi di segnalazione come RIPK1, TRAF6 e MALT1, mentre catalizza le catene poliubiquitinate legate a 'Lys-48' per indirizzare le proteine alla degradazione proteasomica.
• Espibe anche un'inibizione non catalitica del complesso chinasi I-kappa-B (IKK) attraverso l'associazione mediata da poliubiquitina con NEMO (IKBKG), prevenendo la fosforilazione mediata da MAP3K7.
• A livello subcellulare, il TNFAIP3 si trova nel citoplasma, nel nucleo e nel lisosoma, riflettendo i suoi ruoli multifunzionali.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e l'acetilazione; contiene domini a dito di zinco e un dominio deubiquitinasi OTU, classificandolo come una proteasi tiolica legante lo zinco e una transferasi.
• Le mutazioni nel TNFAIP3 sono associate a malattie autoimmuni e infiammatorie, e agisce come inibitore della morte cellulare programmata.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 600-738 del TNFAIP3 umano, una regione che probabilmente contiene sia motivi a dito di zinco che il dominio OTU; pertanto, l'anticorpo potrebbe riconoscere sia la forma a lunghezza intera che possibili isoforme troncate.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è di circa 90 kDa; convalidare con appropriati controlli positivi e negativi (es. cellule stimolate vs non stimolate) data la natura inducibile di A20.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), considerare i metodi di recupero dell'antigene e ottimizzare la diluizione; notare la localizzazione citoplasmatica e nucleare di A20.
• Per l'ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di cattura potrebbe essere fattibile; tuttavia, essendo un policlonale, la coerenza tra lotti deve essere monitorata.
• La reattività crociata con il ratto è specificata; confermare la reattività nel vostro specifico sistema di campione tramite esperimenti pilota.

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