Anticorpo policlonale anti-TNRC6A per WB, IF/ICC, ELISA - Q8NDV7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della TNRC6A

• TNRC6A, nota anche come GW182, TNRC6, CAGH26 o GW1, è una proteina da 210 kDa codificata dal gene TNRC6A sul cromosoma 8. È un componente chiave del complesso di silenziamento indotto da RNA (RISC).
• Funziona nel silenziamento genico mediato da RNA da microRNA (miRNA) e siRNA. È necessaria per la repressione traduzionale dipendente da miRNA e per la clivaggio endonucleolitico dipendente da siRNA.
• Agisce come proteina impalcatura (scaffolding), associandosi con le proteine argonaute legate a mRNA parzialmente complementari e reclutando i complessi deadenilasi CCR4-NOT e PAN per facilitare il decadimento dell'mRNA.
• Si localizza prevalentemente nel citoplasma, specificamente arricchita nei corpi di elaborazione (P-bodies), che sono siti di degradazione e stoccaggio dell'mRNA.
• Espressa in modo ubiquitario nei tessuti umani, riflettendo il suo ruolo fondamentale nella regolazione genica post-trascrizionale.
• Fosforilata post-traduzionalmente e subisce splicing alternativo, producendo multiple isoforme che possono modulare la sua attività o le sue interazioni.
• Contiene domini di legame all'RNA e una regione a coiled-coil; coinvolta nelle interazioni ospite-virus e collegata all'epilessia attraverso studi di associazione genetica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 950–1050 della TNRC6A umana (NP_055309.2). Questa regione può essere conservata tra le specie, supportando la reattività crociata con topo e ratto.
• Per il western blot (WB), considerare l'utilizzo di lisati cellulari totali da linee cellulari umane, di topo o di ratto, poiché TNRC6A è espressa in modo ubiquitario. Il peso molecolare previsto è di ~210 kDa; assicurare un'adeguata risoluzione del gel e condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza (IF) o nell'immunocitochimica (ICC), è prevista la localizzazione citoplasmatica e nei corpi P. La colorazione concomitante con marcatori dei corpi P (es. DCP1A) può confermare la specificità.
• Per le applicazioni ELISA, validare l'anticorpo utilizzando TNRC6A ricombinante o saggi di blocco con peptidi per confermare l'affinità di legame e la specificità.
• Essendo un anticorpo policlonale, può verificarsi variabilità da lotto a lotto. Includere controlli appropriati e ottimizzare i fattori di diluizione per ogni impostazione sperimentale.

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