Anticorpo Monoclonale Anti-TOM20 (Coniugato ) per WB e IF - Q15388

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di TOM20

• La subunità recettrice dell'importo mitocondriale TOM20, anche designata MAS20, MOM19 o TOM20, è codificata dal gene TOMM20.
• Componente recettrice centrale del complesso della traslocasi della membrana esterna (TOM); insieme a TOMM22, riconosce e lega le preproteine mitocondriali citosoliche tramite le loro sequenze di targeting N-terminali, dirigendole nel poro di traslocazione TOM40. Riferimenti correlati: PMID:40080546 PMID:18331822
• Nei mitocondri depolarizzati, il complesso TOM si associa a VDAC2 e alla chinasi PINK1; questa interazione stabilizza PINK1 sulla membrana esterna e innesca la mitofagia attraverso il reclutamento della ligasi E3 di ubiquitina PRKN (Parkin). Riferimenti correlati: PMID:40080546
• Necessario per la traslocazione attraverso la membrana mitocondriale esterna delle monoossigenasi del citocromo P450 (per similarità).
• Localizzazione subcellulare: saldamente ancorato nella membrana mitocondriale esterna tramite un'unica elica transmembrana C-terminale (residui 126–145), con il dominio N-terminale esposto al citosol.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione in più residui e legami isopeptidici (coniugazione Ubl); queste possono regolare l'attività del recettore e il turnover proteico.
• Un attore chiave nella biogenesi mitocondriale, nel controllo di qualità e nella sopravvivenza cellulare, rendendolo un bersaglio prezioso negli studi sulla neurodegenerazione, i disturbi metabolici e il cancro.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è pre-marcato con , un colorante fluorescente rosso lontano, che consente il rilevamento diretto senza anticorpi secondari nell'immunofluorescenza (IF/ICC, IF-P) e nel western blot (WB) quando si utilizzano sistemi di imaging nel vicino infrarosso.
• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 20–145 di TOM20 umano, coprendo il dominio recettoriale citosolico; l'arricchimento di frazioni mitocondriali o l'uso di marcatori specifici per organelli può migliorare la specificità del segnale.
• Dimostra reattività incrociata con TOM20 umano, di topo e di ratto; validare nell'appropriata linea cellulare (es. HeLa, HepG2, NIH/3T3) o tessuto.
• Per il WB, attendersi una banda che migra a circa 16 kDa; per l'IF, la colorazione co-marcata con un marcatore mitocondriale (es. anti-COX IV, MitoTracker) conferma la localizzazione sulla membrana esterna.
• Si raccomanda l'ottimizzazione della diluizione dell'anticorpo; le concentrazioni iniziali tipiche per gli anticorpi coniugati vanno da 1:50 a 1:200 per IF e da 1:500 a 1:2000 per WB, ma devono essere titolate nel sistema sperimentale.

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